Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması

ÇETİNKAYA, Nedim; TUNÇ, Nedim; AKTEPE, O. Cem; ÇİFTÇİ, İ. Hakkı; Altindis, Mustafa; USLUER, Sibel

Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması

Mustafa ALTINDİŞ, (Afyon Kocatepe Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Afyon, Türkiye)

Sibel USLUER, (Afyon Kocatepe Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Afyon, Türkiye)

İ. Hakkı ÇİFTÇİ, (Afyon Kocatepe Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Afyon, Türkiye)

Nedim TUNÇ, (Afyon Kocatepe Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Afyon, Türkiye)

Nedim ÇETİNKAYA, (Afyon Kocatepe Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Afyon, Türkiye)

O. Cem AKTEPE (Afyon Kocatepe Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Afyon, Türkiye)

Mikrobiyoloji Bülteni

9 0

Yıl: 2007 Cilt: 41 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 29 - 37 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması

Öz:

Clostridium difficile ile ilişkili hastalık, özellikle hastanede yatan hastalarda, geniş spektrumlu antibiyotik kullanımına bağlı olarak ortaya çıkabilmektedir. Bu çalışmada, poliklinik ve servis hastalarında antibiyotik kullanımına bağlı olarak gelişen ishallerde etken olarak C.difficile'nln araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, Ocak-Aralık 2005 tarihleri arasında hastanemize başvuran ve antibiyotik kullanım öyküsü olan ishalli 45 poliklinik ve 46 (11 'i yoğun bakım) servis hastası dahil edilmiştir. Ayrıca taşıyıcılığın araştırılması açısından, antibiyotik kullanmamış, sağlıklı ancak hastalar ile yakın teması olan 7 yoğun bakım ve 20 gıda personeli de çalışılmıştır. Kırkbeşi (%49.5) erkek olan hastaların yaş aralığı 16-80 yıl, 21'i (%78) erkek olan personelin yaş aralığı ise 25-55 yıldır. Çalışma gruplarından alınan dışkı örnekleri, rutin bakteriyolojik besiyerlerinin yanı sıra C.difficile ağar {C.difficile Ağar Base, Oxoid) besiyerine ekilmiş ve kültürlerde üreyen bakteriler özgül antiserumla yapılan lateks aglütinasyon testi ile doğrulanmıştır. Örneklerde C.difficile toksin A varlığı lateks yöntemi (Oxoid, UK), toksin A ve B varlığı ise enzim immunoassay (ELISA; Seramun GmbH, Serazym C.difficile toxin A+B) yöntemiyle araştırılmıştır. Sonuç olarak, 91 hastadan 13'ünün (%14.3) kültüründen C.difficile izole edilmiş, personelin hiçbirisinde Cdifficile taşıyıcılığı saptanmamıştır. Poliklinik (%15.5) ve servis hastaları (%17.1) arasında C.difficile pozitifliği açısından anlamlı bir fark bulunmamıştır (p>0.05). Kültür pozitifliği saptanan hastaların tümünde ELISA toksin A+B yöntemiyle de pozitiflik (%100) belirlenirken, sadece 4'ü (%30.7) toksin A lateks yöntemi ile pozitif olarak bulunmuştur. Hastaların %84.6'sının (11/13) ampisilin/sülbaktam, birer hastanın (%7.7) ise kotrimoksazol-SXT ve makrolid antibiyotikler kullandığı belirlenmiş; ishal gelişiminde ampisilin/sülbaktam kullanımının istatistiksel açıdan anlamlı olduğu bulunmuştur (p<0.05).Çalışmamızın bulguları, C.difficile saptanmasında kültür sonuçları alınmadanönce %100 duyarlılık ve özgüllüğe sahip ELISA toksin A+B yönteminin hızlı tanı için kullanılabilir olduğunu, buna karşın özgüllüğünün yüksek (%100) olmasına rağmen duyarlılığı düşük (%30.7) olan toksin A lateks yönteminin uygun olmadığını göstermektedir.

Anahtar Kelime: Duyarlılık ve özgüllük İshal Anti-bakteriyel ajanlar Enzim bağlı immünosorbent tayini Clostridium difficile Yan etkiler Lateks fiksasyon testleri

Konular: Mikrobiyoloji

İnvestigation of the presence of Clostridium difficile in antibiotik associated diarrhea patiants by culture and toxin detection methods

Öz:

Clostridium d/Yf/c/Ve-associated disease can be observed especially in hospitalized patients who use broad-spectrum antibiotics. The aim of this study was to investigate the presence of C.difficile as the causative agent of diarrhea in outpatients and inpatients. During January-December 2005, 45 outpatients and 46 inpatients (of them 11 were intensive care unit patients) who had developed diarrhea due to antibiotic use, were included to the study. In addition 7 intensive care unit personnel and 20 food handlers were also included to the study in order to detect their carrier states. The age range of patients was 16-80 years, and of them 45 (49.5%) were male, while the age range of the personnel was 25-55 years, and of them 21 (78%) were male. Stool samples collected from the study groups were cultivated in C.difficile agar media {C.difficile Agar Base, Oxoid) as well as on routine bacteriologic media, and C.difficile growth was confirmed by latex agglutination test with the use of specific antisera. The presence of C.difficile toxin A was investigated by latex method (Oxoid, UK), and toxin A and B was searched by enzyme-linked immunoassay (ELISA; Seramun GmbH, Serazym C.difficile Toxin A+B), in the stool samples. While C.difficile was isolated from 13 (14.3%) of the 91 samples, no positive result was detected in the personnel. There was no statistically significant difference between outpatient and inpatient groups by^means of C.difficile culture positivity (15.5% and 17.1%,respectively) (p>0.05). All of the culture positive samples were also found positive by ELISA Toxin A+B method (100%), but only 4 of them (30.7%) yielded positive result by Toxin A latex test. It was detected that 84.6% (11/13) of the patients had used ampicillin/sulbactam, 7.7% (1/13) used cotrimoxazole-SXT, and 7.7% (1/13) used macrolide antibiotics. The use of ampicillin/sulbactam was found statistically significant in development of diarrhea (p<0.05). Our data indicated that ELISA Toxin A+B is a reliable method with 100% specificity and sensitivity in the rapid diagnosis of C.difficile until the culture results were obtained, however,although specificity of Toxin A latex test is 100%, its use alone as a primary rapid diagnostic test was not recommended because of its low (30.7%) sensitivity.

Anahtar Kelime: Clostridium difficile Adverse effects Latex Fixation Tests Sensitivity and Specificity Diarrhea Anti-Bacterial Agents Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Konular: Mikrobiyoloji

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik

1. Kıyan M. Anaerob, sporlu, Gram pozitif basiller, s: 623-59. Ustaçelebi Ş (ed), Temel ve Klinik Mikrobiyoloji. 1999, Güneş Kitabevi, Ankara.
2. Theilman NM. Antibiotic associated colitis, pp:1111-21. In: Mandell GL, Bennett JE, Dolin R (eds), Principles and Practice of Infectious Diseases. 2000, 5 th ed. Churchill Livingstone, Philadelphia.
3. Mülazımoğlu L. Antibiyotiğe bağlı ishal. Klimik Derg 1996; 9: 15-17.
4. Çakır M, Özsan M. Clostridium difficile'ye bağlı kolit. Güncel Gastroenteroloji 1997; 1: 439-52.
5. Reinke CM, Messick CR. Update on Clostridium af/ff/c/te-induced colitis, part 1. Am J Hosp Pharm 1994; 51: 1771-81,
6. Legaria MC, Lumelsky G, Rosetti S. Clostridium difficile-associated diarrhea from a general hospital in Argentina. Anaerobe 2003; 9: 113-6.
7. Boral ÖB, Özkan E, Büğet E. Uzun süreli antibiyotik tedavisi gören ishalli çocuk dışkılarında Clostridium difficile'nin araştırılması. Klimik Derg 1994; 7: 105-7.
8. Erciş S, Engin A, Hasçelik G. Clostridium difficile'ye bağlı ishal hastalarının 6 yıllık değerlendirilmesi. Mikrobiyol Bült 2004; 38: 45-50.
9. Pepin J, Valiquette L, Alary ME, et al. Clostridium difficile-associated diarrhea in a region of Ouebec from 1991 to 2003: a changing pattern of disease severity. CMAJ 2004; 171: 466-72.
10. Wroblewska MM, Swoboda-Kopec E, Rokosz A, et al. Detection of Clostridium difficile and toxin . A (TcdA) in stool specimens from hospitalized patients. Pol J Microbiol 2005; 54: 111-5.
11. Boral ÖB. Clostridium difficile infeksiyonu ön tanılı hastaların dışkı örneklerinde toksin A ve B'nin belirlenme sıklığı. Türk Mikrobiyol Cem Derg 2002; 32: 220-4.
12. Schroeder MS. Clostridium difficile-associated diarrhea. Am Fam Physician 2005; 71: 921-8.
13. Karaer P, Yarkın F, Alhan E ve ark. İshalli ve asemptomatik kişilerin dışkılarında C.difficile ve toksinleri ile diğer enterik patojenlerin insidansı. Çukurova Üni Tıp Fak Derg 1996; 21: 88-95.
14. Di Persio JR, Varga FS, Conwell DL, Kraft JA, Kozak KJ, Willis DH. Development of a rapid enzyme immunoassay for Clostridium difficile toxin A and its use in the diagnosis of C.difficile- associated disease. J Clin Microbiol 1991; 29: 2724-30.
15. Ferreira CEA, Nakano V, Avila-Campos MJ. Cytotoxicity and antimicrobial susceptibility of Clostridium difficile isolated from hospitalized children with acute diarrhea. Anaerobe 2004; 10: 171-7.
16. Alfa MJ, Swan B, Van Dekerhove B, Pang P, Harding GK. The diagnosis of Clostridium difficile- associated diarrhea: comparison of Triage C.difficile panel, EIA for Tox A/B and cytotoxin assays. Diagn Microbiol Infect Dis 2002; 43: 257-63.
17. Aldeen WE, Binham M, Aiderzada A, Kucera J, Jensa S, Carroll KC. Comparison of the Tox A/B test to a cell culture cytotoxicity assay for the detection of Clostridium difficile in stools. Diagn Microbiol Infect Dis 2000; 36: 211-3.
18. Yapar N, Şener A, Karaca B, et al. Antibiotic-associated diarrhea in a Turkish outpatient population: investigation of 288 cases. J Chemother 2005; 17: 77-81.
19. Bartlett JG. Antibiotic-associated diarrhea. Clin Infect Dis 1992;15:573-81.

APA	Altindis M, USLUER S, ÇİFTÇİ İ, TUNÇ N, ÇETİNKAYA N, AKTEPE O (2007). Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. , 29 - 37.
Chicago	Altindis Mustafa,USLUER Sibel,ÇİFTÇİ İ. Hakkı,TUNÇ Nedim,ÇETİNKAYA Nedim,AKTEPE O. Cem Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. (2007): 29 - 37.
MLA	Altindis Mustafa,USLUER Sibel,ÇİFTÇİ İ. Hakkı,TUNÇ Nedim,ÇETİNKAYA Nedim,AKTEPE O. Cem Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. , 2007, ss.29 - 37.
AMA	Altindis M,USLUER S,ÇİFTÇİ İ,TUNÇ N,ÇETİNKAYA N,AKTEPE O Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. . 2007; 29 - 37.
Vancouver	Altindis M,USLUER S,ÇİFTÇİ İ,TUNÇ N,ÇETİNKAYA N,AKTEPE O Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. . 2007; 29 - 37.
IEEE	Altindis M,USLUER S,ÇİFTÇİ İ,TUNÇ N,ÇETİNKAYA N,AKTEPE O "Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması." , ss.29 - 37, 2007.
ISNAD	Altindis, Mustafa vd. "Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması". (2007), 29-37.

APA	Altindis M, USLUER S, ÇİFTÇİ İ, TUNÇ N, ÇETİNKAYA N, AKTEPE O (2007). Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, 41(1), 29 - 37.
Chicago	Altindis Mustafa,USLUER Sibel,ÇİFTÇİ İ. Hakkı,TUNÇ Nedim,ÇETİNKAYA Nedim,AKTEPE O. Cem Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni 41, no.1 (2007): 29 - 37.
MLA	Altindis Mustafa,USLUER Sibel,ÇİFTÇİ İ. Hakkı,TUNÇ Nedim,ÇETİNKAYA Nedim,AKTEPE O. Cem Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.41, no.1, 2007, ss.29 - 37.
AMA	Altindis M,USLUER S,ÇİFTÇİ İ,TUNÇ N,ÇETİNKAYA N,AKTEPE O Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2007; 41(1): 29 - 37.
Vancouver	Altindis M,USLUER S,ÇİFTÇİ İ,TUNÇ N,ÇETİNKAYA N,AKTEPE O Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2007; 41(1): 29 - 37.
IEEE	Altindis M,USLUER S,ÇİFTÇİ İ,TUNÇ N,ÇETİNKAYA N,AKTEPE O "Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması." Mikrobiyoloji Bülteni, 41, ss.29 - 37, 2007.
ISNAD	Altindis, Mustafa vd. "Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması". Mikrobiyoloji Bülteni 41/1 (2007), 29-37.