Bu çalışmanın amacı, bakır sülfatının (CuSO4) etkisinin ayak banyosunda geçen sığır sayısına bağlı olup olmadığını saptamaktır. Çalışmanın gerçekleştirildiği sağmal işletmede; Holştayn ve Simmental ırkı 360 baş inek, 24’lü sağım ünitesinde 15 ayrı grup şeklinde günde üç defa sağıldılar. Hayvanların tamamı, %0, %2 ve %4 CuSO4 içeren ayak banyosundan (220x90x15cm) geçirildi. Antiseptik ayak banyosundan 24 hayvan geçtikçe, banyo sıvısından örnek alındı. Biriktirilen örnekler pH ve mikrobiyolojik yönden incelendi. pH>5 olan ayak banyolarındaki kimyasalların antiseptik özelliğini kaybettiği belirlendi. İçlerinden 360 hayvan geçtikten sonra geride kalan %0, %2 ve %4 bakır sülfat solüsyonlarının pH ortalaması sırasıyla 8.13, 5.00 ve 4.20 olarak bulundu. %2 CuSO4 solüsyonundan 7.gruptaki hayvanlar geçtikten sonra ortalama pH değeri 5’den yüksek bulunurken, %4’lük CuSO4 solüsyonundan 15.gruptaki hayvanlar geçtikten sonra ortalama pH değeri 5’ten düşük olduğu saptandı. Ayak banyosunun renginin pH değişimi ile ilgili olduğu belirlendi. Örnekler bakteri ve mantar gelişimi için 24-72 saat inkübe edildi. Kontrol grup CuSO4 solüsyonlarında E.coli bulunurken, yapılan mantar incelemesinde hiç bir grupta herhangi bir üremeye rastlanmadı. Sonuç olarak; pH değerinin ayak banyosundan kaç hayvan geçtiği ile ilişkili olduğu saptandı. %2’lik CuSO4 konsantrasyonundan 168 hayvan, %4’lük konsantrasyonundan 360 hayvan geçtikten sonra antiseptik etkinliğini kaybettiği belirlendi.