TY - JOUR TI - Production, purification and characterization of the recombinant Brucella abortus rP17 protein AB - Sitozolik immunoreaktif B. abortus P17 proteini, pCold I soğuk-şok ekspresyon vektörüne p17 geni klonlanarak Escherichia coli’de 6xHistidin kuyruklu rekombinant protein (rP17) şeklinde üretildi. Klonlanan p17 geninin DNA sekans analizi, rekombinant rP17 proteininin 83 hidrofobik, 42 hidrofilik, 35 bazik ve 21 asidik olmak üzere 181 amino asitten oluştuğunu gösterdi. Teorik olarak izoelektrik noktası 6.42 olarak belirlendi. -0.097 olan GRAVY indeksi proteinin eriyebilir olduğuna işaret etmektedir. İnstabilite indeksi, IPTG ile indüklenerek transforme E. coli hücrelerinde eksprese edilen rP17 proteininin stabil olduğunu göstermektedir. İndüklenmiş ve indüklenmemiş bakteri lizatlarının SDS-PAGE analizleri göreceli moleküler ağırlığı 24 kDa olan rP17 proteininin ekspresyonunu göstermektedir. rP17 proteini, Ni-NTA affinite kromatografisi ve SDS-PAGE sonrası poliakrilamid jelden elusyonu içeren iki aşamada saflaştırıldı ve Western blot yöntemi ile incelendi. Ön sonuçlar rekombinant rP17 proteininin immün reaktifliğini koruduğunu göstermiştir. Bu aşamada, tanımlanmış serumlardan oluşan kapsamlı bir koleksiyon ile diyagnostik performansının değerlendirilmesine yönelik olarak rP17 proteininin büyük ölçek üretimi gerçekleştirilmektedir. AU - BÜYÜKTANIR YAŞ, ÖZLEM AU - GENÇ, Oktay AU - YURDUSEV, Nevzat PY - 2011 JO - Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi VL - 17 IS - 1 SN - 1300-6045 SP - 135 EP - 140 DB - TRDizin UR - http://search/yayin/detay/109633 ER -