Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması

Kesli, Recep; OZDEMIR, MEHMET; KURTOĞLU, Güzel Muhammet; özkalp, birol; BAYSAL, Bülent

Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması

Güzel Muhammet KURTOĞLU, (Konya Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Merkez Laboratuvarı, Konya, Türkiye)

Mehmet ÖZDEMİR, (Selçuk Üniversitesi, Meram Tıp Fakültesi, Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Konya, Türkiye)

Bülent BAYSAL, (Selçuk Üniversitesi, Meram Tıp Fakültesi, Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Konya, Türkiye)

Recep KEŞLİ, (Konya Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Merkez Laboratuvarı, Konya, Türkiye)

Birol ÖZKALP (Selçuk Üniversitesi, Sağlık Hizmetleri Meslek Yüksek Okulu, Tıbbi Lab. Bölümü, Konya, Türkiye)

Mikrobiyoloji Bülteni

46 0

Yıl: 2011 Cilt: 45 Sayı: 2 Sayfa Aralığı: 266 - 273 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması

Öz:

Tüberküloz (TB), morbidite ve mortalitesi oldukça yüksek enfeksiyon hastalıklarından biri olarak tüm dünyada ve ülkemizde halen önemini korumaktadır. TB kontrol programının en önemli aşaması olan aktif olguların tespiti için Mycobacterium tuberculosis’in izolasyonu, tiplendirilmesi ve ilaç direncinin saptanmasında klinik mikobakteriyoloji laboratuvarları büyük role sahiptir. Bu çalışmada, TB şüpheli hastaların klinik örneklerinden M.tuberculosis kompleks (MTC) izolasyon oranının araştırılması ve katı ve/veya sıvı besiyerinde üretilen mikobakterilerin BACTEC NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 hızlı testi ile karşılaştırmalı olarak tanımlanması amaçlanmıştır. Çalışmaya, hastanemizin çeşitli servislerine başvuran ve tüberküloz ön tanısıyla izlenen anti-HIV seronegatif 1670 hastaya ait klinik örnek dahil edilmiştir. Örneklerin dekontaminasyon/ homojenizasyonu NALC-NaOH yöntemi ile yapılmış; hazırlanan preparatlar Erlich-Ziehl-Neelsen yöntemiyle boyanarak aside dirençli basil (ARB) yönünden direkt mikroskobik olarak incelenmiştir. Kültür için tüm örnekler, BACTEC™ MGIT-960 (Becton Dickinson, ABD) ve Löwenstein-Jensen besiyerlerine ekilmiştir. 37°C’de 6-8 haftalık inkübasyondan sonra üreyen mikobakterilerin tanımlanması BACTEC™ NAP (Becton Dickinson, ABD) ve TB Ag MPT64 hızlı testi (SD Bioline Ag MPT64 Rapid™; Standard Diagnostics, Kore) ile yapılmıştır. Çalışmamızda, tüberküloz şüpheli hastalara ait klinik örneklerin %3.7 (63/1670)’sinde Löwenstein-Jensen ve/veya MGIT-960 ile kültür pozitifliği saptanmış; örneklerde ARB pozitifliği ise %1.6 (28/1670) olarak bulunmuştur. Mikobakteri üremesi saptanan 63 örneğin 53 (%84)’ü BACTEC NAP testi ile; 61 (%97)’i ise TB MPT64 testi ile MTC olarak tanımlanmıştır. BACTEC NAP testi referans kabul edildiğinde, TB MPT64 testinin tüm MTC izolatlarını doğru olarak tanımladığı (duyarlılık %100), buna karşın yalancı pozitiflik oranının %12.7 olduğu (özgüllük %87) görülmüştür. MTC üremesi saptanan 53 örneğin 36’sı balgam, dördü bronkoalveoler lavaj, dördü idrar, üçü açlık mide suyu, üçü plevral sıvı ve birer adedi olmak üzere apse, periton sıvısı ve beyin omurilik sıvısı örneğidir. Kültürlerinde MTC üreyen örneklerde ARB pozitifliğinin ise %41.5 (22/53) olduğu saptanmıştır. MTC suşlarının izole edildiği hastalar incelendiğinde; %72 (38/53)’sinin erkek ve %98 (52/53)’inin erişkin (yaş aralığı: 20-85 yıl) olduğu belirlenmiştir. Sonuç olarak, bölgemizde TB şüpheli hastalarda saptanan MTC pozitiflik oranı %3.1 (53/1670) olarak bulunmuş ve bu oranın ülkemizde yapılan diğer çalışmalarla uyumlu olduğu izlenmiştir. İmmünokromatografik TB MPT64 testinin ise, aynı günde sonuç vermesi nedeniyle hızlı, uygulaması kolay ve duyarlı bir yöntem olarak katı ve/veya sıvı besiyerinde üretilen mikobakterilerin tanımlanmasında kullanılabileceği, ancak bulgularımızın, ülkemizde yapılacak daha geniş kapsamlı çalışmalarla desteklenmesi gerektiği kanısına varılmıştır.

Anahtar Kelime:

Konular: Mikroskopi Mikrobiyoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Enfeksiyon Hastalıkları

Isolation rate of mycobacterium tuberculosis complex from patients with suspected tuberculosis and identification of the strains with BACTEC™ NAP and immunochromatographic TB Ag MPT64 Rapid™ tests

Öz:

Tuberculosis (TB) which is still one of the important infectious diseases in the world as well as Turkey, results in high morbidity and mortality. Clinical mycobacteriology laboratories have crucial roles in the identification, typing and susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis. The aims of this study were the investigation of the isolation rate of M.tuberculosis complex (MTC) from the clinical specimens of TB-suspected patients and to compare identification of mycobacteria isolated from solid and/or liquid media by using BACTEC NAP and immunochromatographic TB Ag MPT64 rapid test. A total of 1670 patients who were admitted to outpatients clinics of our hospital and prediagnosed as TB, have been included in the study. All the patients were anti-HIV seronegative. NALC-NaOH method were used for decontamination/ homogenization, and preparations from samples were stained with Erlich-Ziehl-Neelsen method to detect acid-resistant bacilli (ARB) in direct microscopy. All of the samples were inoculated into BACTEC™ MGIT-960 (Becton Dickinson, USA) and Löwenstein-Jensen (LJ) media for cultivation and incubated at 37°C for 6-8 weeks. Mycobacteria that were grown in the media have been identified by BACTEC™ NAP (Becton Dickinson, USA) and TB Ag MPT64 rapid test (SD Bioline Ag MPT64 Rapid™; Standard Diagnostics, Korea). The culture positivity in the samples of TB-suspected patients was found to be 3.7% (63/1670) with LJ and/or MGIT-960 methods, whereas ARB positivity rate was 1.6% (28/1670). Fifty-three (84%) out of culture positive 63 samples have been identified as MTC by BACTEC NAP test, while 61 (97%) were found as MTC by TB MPT64 test. Considering BACTEC NAP test as the reference method, TB MPT64 test identified all the MTC strains correctly (sensitivity: 100%), however the false positivity rate was estimated as 12.7% (specificity: 87%). Of 53 MTC positive samples, 36 were sputum, four were bronchoalveolar lavage, four were urine, three were gastric fluid, three were pleural fluid, and one of each were abscess, peritoneal fluid and cerebrospinal fluid samples. ARB positivity rate was detected as 41.5% (22/53) among MTC culture positive samples. Of the patients who were infected with MTC, 72% (38/53) were male and 98% (52/53) were adults (age range: 20-85 years). Our data indicating 3.1% (53/1670) isolation rate of MTC from TB-suspected patients in our region were in concordance with the other results reported from Turkey. In conclusion, immunochromatographic TB Ag MPT64 test which seemed to be useful for the rapid identification of mycobacteria grown on solid and/or liquid, was practical to perform and had high sensitivity, however further larger-scaled studies are needed to support our data in our country.

Anahtar Kelime:

Konular: Mikroskopi Mikrobiyoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Enfeksiyon Hastalıkları

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik

1. Kiliç A, Drake W. Advance in the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis and detection of drug resistance, pp: 387-410. In: Tang YW, Stratton C (eds), Advance Techniques in Diagnostic Microbiology. 2006, Springer/ Kluwer Press, New York.
2. Laughon, BE. New tuberculosis drugs in development. Curr Top Med Chem 2007; 7(5): 463-73.
3. Centers for Disease Control and Prevention. Extensively Drug-Resistant Tuberculosis-United States, 1993- 2006. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2007; 57(11): 281-5.
4. World Health Organization. Global tuberculosis control: surveillance, planning, financing. WHO Report 2008, Geneva. Available from: http://www.who.int/tb/publications/global_report/2008/pdf/fullreport.pdf
5. European Centre for Disease Prevention and Control. European Tuberculosis Surveillance Network. Available from: http://www.ecdc.europa.eu/en/activities/surveillance/european_tuberculosis_surveillance_network
6. T.C. Sağlık Bakanlığı Verem Savaş Daire Başkanlığı. Türkiye’de Verem Savaşı 2008 Raporu. http://www.verem. org.tr/pdf/TB_raporu_2008_slayt.ppt
7. World Health Organization. The use of liquid medium for culture and DST. Available from: http://www.who.int/tb/dots/laboratory/policy/en/index3.html
8. Abe C, Hirano K, Tomiyama T. Simple and rapid identification of the Mycobacterium tuberculosis complex by immunochromatographic assay using anti-MPB64 monoclonal antibodies. J Clin Microbiol 1999; 37(11): 3693-7.
9. Hasegawa N, Miura T, Ishii K, et al. New simple and rapid test for culture confirmation of Mycobacterium tuberculosis complex: a multicenter study. J Clin Microbiol 2002; 40(3): 908-12.
10. Nagai S, Wiker HG, Harboe M, Kinomoto M. Isolation and partial characterization of major protein antigens in the culture fluid of Mycobacterium tuberculosis. Infect Immun 1991; 59(1): 372-82.
11. Purohit MR, Mustafa T, Wiker HG, Morkve O, Sviland L. Immunohistochemical diagnosis of abdominal and lymph node tuberculosis by detecting Mycobacterium tuberculosis complex specific antigen MPT64. Diagn Pathol 2007; 2: 36.
12. Park MY, Kim YJ, Hwang SH, et al. Evaluation of an immunochromatographic assay kit for rapid identification of Mycobacterium tuberculosis complex in clinical isolates. J Clin Microbiol 2009; 47(2): 481-4.
13. Marzouk M, Kahla IB, Hannachi N, et al. Evaluation of an immunochromatographic assay for rapid identification of Mycobacterium tuberculosis complex in clinical isolates. Diagn Microbiol Infect Dis 2011; 69(4): 396-9.
14. Balcı İ, Bayram A, Filiz A. Mycobacterium tuberculosis’de birinci seçenek ilaçlara direnç. İnfeksiyon Derg 1999; 13(4): 521-5.
15. Orhan G, Zer Y, Balcı İ, Bayram A, Korkmaz G. Mikobakteriyoloji laboratuvarında incelenen örneklerin retrospektif olarak değerlendirilmesi. Türk Mikrobiyol Cem Derg 2002; 32(3-4): 225-9.
16. Baylan O, Kısa Ö, Albay A, Doğancı L. Mikobakteriyoloji laboratuvarımızda 2002 yılında tüberküloz olgularından izole edilen Mycobacterium tuberculosis kompleks (MTC) suşları ve antitüberküloz ilaç duyarlılık sonuçları. Gülhane Tıp Derg 2003; 45(3): 256-62.
17. Dündar D, Sönmez Tamer G. Mycobacterium tuberculosis kompleksi izolatlarının primer antitüberküloz ilaçlara direnç oranları. Klimik Dergisi 2009; 22(2): 52-4.
18. Washington WJ, Alen S, Janda W, et al. Mycobacteria, pp: 1064-124. In: Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 2006, 6th ed. Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia.
19. Brunello F, Favari F, Fontana R. Comparison of the MB/BacT and BACTEC 460 TB systems for recovery of mycobacteria from various clinical specimens. J Clin Microbiol 1999; 37(4): 1206-9.
20. Samra Z, Kaufman L, Bechor J, Bahar J. Comparative study of three culture systems for optimal recovery of mycobacteria from different clinical specimens. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2000; 19(10): 750-4.
21. Mirovic V, Lepsanovic Z. Evaluation of the MB/BacT system for recovery of mycobacteria from clinical specimens in comparison to Lowenstein-Jensen medium. Clin Microbiol Infect 2002; 8(11): 709-14.
22. Günal S, Durmaz R, Oltu B. Bir üniversite hastanesi mikobakteriyoloji laboratuvarında yapılan geleneksel tanı yöntemlerinin değerlendirilmesi. 6. Ulusal Mikobakteri Sempozyumu. 23-25 Kasım 2006, Ankara. Sempozyum Kitabı, s: 234.
23. Kim MN, Lee SH, Yang SE, Pai CH. Mycobacterial testing in hospital laboratories in Korea: results of a survey of 40 university or tertiary-care hospitals. Korean J Clin Pathol 1999; 19(1): 86-91.
24. Chang CL, Park TS, Kim MN, Lee NY, Lee HJ, Suh JT. Survey on changes in mycobacterial testing practicies in Korean laboratories. Korean J Clin Microbiol 2001; 4(2): 108-14.
25. Koh WJ, Kwon OJ. Treatment of tuberculosis patients in the private sector in Korea. Tuberc Respir Dis 2004; 56(5): 443-9.
26. Yim JJ, Han SK. Diagnosis and treatment of nontuberculous mycobacterial pulmonary diseases. J Korean Med Assoc 2005; 48(6): 563-70.
27. Ismail NA, Baba K, Pombo D, Hoosen AA. Use of an immunochromatographic kit for the rapid detection of Mycobacterium tuberculosis from broth cultures. Int J Tuberc Lung Dis 2009; 13(8): 1045-7.
28. Marzouk M, Kahla IB, Hannachi N, et al. Evaluation of an immunochromatographic assay for rapid identification of Mycobacterium tuberculosis complex in clinical isolates. Diagn Microbiol Infect Dis 2011; 69(4): 396-9.
29. Fabre M, Vong R, Gaillard T, et al. Evaluation of the SD BIOLINE TB Ag MPT64 Rapid® for the diagnosis of tuberculosis. Pathol Biol (Paris) 2011; 59(1): 26-8.
30. Gaillard T, Fabre M, Martinaud C, Vong R, Brisou P, Soler C. Assessment of the SD Bioline Ag MPT64 Rapid ™ and the MGIT™ TBc identification tests for the diagnosis of tuberculosis. Diagn Microbiol Infect Dis 2011. DOI:10.1016/j.diagmicrobio.2010.12.011

APA	KURTOĞLU G, OZDEMIR M, BAYSAL B, Kesli R, özkalp b (2011). Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. , 266 - 273.
Chicago	KURTOĞLU Güzel Muhammet,OZDEMIR MEHMET,BAYSAL Bülent,Kesli Recep,özkalp birol Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. (2011): 266 - 273.
MLA	KURTOĞLU Güzel Muhammet,OZDEMIR MEHMET,BAYSAL Bülent,Kesli Recep,özkalp birol Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. , 2011, ss.266 - 273.
AMA	KURTOĞLU G,OZDEMIR M,BAYSAL B,Kesli R,özkalp b Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. . 2011; 266 - 273.
Vancouver	KURTOĞLU G,OZDEMIR M,BAYSAL B,Kesli R,özkalp b Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. . 2011; 266 - 273.
IEEE	KURTOĞLU G,OZDEMIR M,BAYSAL B,Kesli R,özkalp b "Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması." , ss.266 - 273, 2011.
ISNAD	KURTOĞLU, Güzel Muhammet vd. "Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması". (2011), 266-273.

APA	KURTOĞLU G, OZDEMIR M, BAYSAL B, Kesli R, özkalp b (2011). Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. Mikrobiyoloji Bülteni, 45(2), 266 - 273.
Chicago	KURTOĞLU Güzel Muhammet,OZDEMIR MEHMET,BAYSAL Bülent,Kesli Recep,özkalp birol Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. Mikrobiyoloji Bülteni 45, no.2 (2011): 266 - 273.
MLA	KURTOĞLU Güzel Muhammet,OZDEMIR MEHMET,BAYSAL Bülent,Kesli Recep,özkalp birol Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.45, no.2, 2011, ss.266 - 273.
AMA	KURTOĞLU G,OZDEMIR M,BAYSAL B,Kesli R,özkalp b Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2011; 45(2): 266 - 273.
Vancouver	KURTOĞLU G,OZDEMIR M,BAYSAL B,Kesli R,özkalp b Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2011; 45(2): 266 - 273.
IEEE	KURTOĞLU G,OZDEMIR M,BAYSAL B,Kesli R,özkalp b "Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması." Mikrobiyoloji Bülteni, 45, ss.266 - 273, 2011.
ISNAD	KURTOĞLU, Güzel Muhammet vd. "Tüberküloz şüpheli hastalardan mycobacterium tuberculosis kompleks izolasyon oranı ve suşların BACTEC™ NAP ve immünokromatografik TB Ag MPT64 Rapid™ testleri ile tanımlanması". Mikrobiyoloji Bülteni 45/2 (2011), 266-273.