İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması

Taylan Ozkan, Aysegul; ATAY, Mediha Gül; SAKRU, NERMİN; ERTABAKLAR, Hatice; TÖZ, Özensoy Seray; OZBEL, YUSUF; HÖKELEK, Murat

İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması

Özensoy Seray TÖZ, (Ege Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Parazitoloji Anabilim Dalı, İzmir, Türkiye)

Yusuf ÖZBEL, (Girilmedi)

Mediha Gül ATAY, (Girilmedi)

Hatice ERTABAKLAR, (Girilmedi)

Nermin ŞAKRU, (Girilmedi)

HİKMET AYŞEGÜL TAYLAN ÖZKAN, (Girilmedi)

Murat HÖKELEK (Girilmedi)

Türkiye Parazitoloji Dergisi

7 0

Yıl: 2002 Cilt: 26 Sayı: 3 Sayfa Aralığı: 239 - 244 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması

Öz:

Birçok bölgemizde Kala-Azar'ın, Güneydoğu Anadolu Bölgesi dışında ise Şark Çıbanının sporadik olarak görülmesi leishmaniasisin akla gelmesini ve ayırıcı tanısını zorlaştırmaktadır. Kala-Azar'ın rezervuarı olan köpeklerde enfeksiyon daha yüksek bir insidansla seyretmekte ancak veteriner hekimlik alanında da benzer sorunlar yaşanmaktadır. Çalışmamızda insan ve köpeklerde serolojik tanının yanısıra direkt mikroskobik tanı ile PZR'ın karşılaştırılması amaçlanmıştır. Kala-Azar şüphesi olan 6 hastadan alınan kemik iliği örnekleri, şark çıbanı şüphesi olan 2 hastadan alınan yara kabuğu ve lezyon aspirasyon örnekleri çalışmaya dahil edilmiştir. Ayrıca serolojik olarak pozitif olduğu saptanan 7, eşik değerin altında pozitif olan (<1/128) l köpekten alınan lenf aspirasyon örnekleri ve nekropsi yapılan 2 köpeğin dalak ve karaciğer örnekleri çalışılmıştır. Altı şüpheli Kala-Azar hastasından bir tanesi tüm testlerle pozitif, üçü ise PZR ve serolojik testlerle pozitif bulunmuş ancak direkt kemik iliği bakılarında amastigota rastlanılamamıştır. iki hasta ise tüm testlerle negatif bulunmuştur. Şark çıbanı şüphesi olan her iki hasta da hem yayma preparatta hem de PZR ile pozitif saptanmıştır. On köpekten elde edilen 12 örnekten 9 tanesi her üç yöntemle de pozitif saptanmıştır. İki örnekte PZR ve serolojik testler pozitifken lenf nodu aspirasyonundan yapılan yayma direkt bakıda negatif bulunmuştur. Diğer bir örnekte serolojik testte eşik değerinin altında, direkt bakı negatif iken PZR pozitif bulunmuştur. Çalışmada, PZR yönteminin insan ve köpeklerde leishmaniasis tanısında kullanılmasının uygun olduğu saptanmıştır. Ancak, alınan örneklerin yeterli olmaması durumunda sadece yayma preparatta değil PZR'da da sorun yaratabileceği düşünülerek diğer yöntemlerle birlikte uygulanmasının tanıda hassasiyeti arttıracağı sonucuna varılmıştır.

Anahtar Kelime: Şark çıbanı Tanı Polimeraz zincir reaksiyonu Zoonozlar Köpekler Serolojik testler

Konular: Mikrobiyoloji Parazitoloji Hematoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Enfeksiyon Hastalıkları Tropik Tıp

Application of polymerase chain reaction (PCR) for diagnosis of Leishmaniasis in clinical samples obtained from human and dogs

Öz:

Suspection and diagnosis of leishmaniasis are not easy because of existance as sporadic cases of Kala-Azar in many of the regions and cutaneous leishmaniasis except southeastern region of Turkey. The infection is observed in a higher incidence in reservuar dog population of Kala-Azar and similar problems are seen in veterinary medicine. The aim of our study was to compare the correlation of the results of PCR with serological and microscopical diagnosis. Bone marrow aspiration samples from six suspected Kala-Azar cases, dermal scraping and lesion aspiration samples from two suspected cutaneous leishmaniasis cases were included. In addition, lymph node aspiration samples of seven seropositive and one borderline (<1/128) and liver and spleen samples of two necropsied dogs were studied. One out of six suspected Kala-Azar cases was found to be positive and two were found to be negative by all methods. Other three cases were found to be positive by PCR and serology while amastigotes could not seen by microscopy. Two suspected cutaneous leishmaniasis cases were found to be positive by all methods. Twelve samples were taken out of ten dogs and nine of them were found to be positive by all methods. Amastigotes could not seen while PCR and serology were found to be positive in two cases. Serological titer was found to be positive below than cut off titer and amastigotes could not be seen while PCR was found to be positive in another case. PCR was found to be suitable in diagnosis of leishmaniasis in human and dogs, but it could be also negative in case of unproper sampling. We concluded that PCR application together with other diagnostic methods will increase the sensitivity of diagnosis.

Anahtar Kelime: Serologic Tests Leishmaniasis Diagnosis Polymerase Chain Reaction Zoonoses Dogs

Konular: Mikrobiyoloji Parazitoloji Hematoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Enfeksiyon Hastalıkları Tropik Tıp

Belge Türü: Makale Makale Türü: Diğer Erişim Türü: Erişime Açık

1. Edrissian H, Darabian P, Zovein Z, Seyedi-Rashti MA, Nadim A, 1981. Application of the indirect fluorescent antibody test in the serodiagnosis of cutaneous and visceral leishmaniasis in Iran. Ann Trop Med Parasitol, 75(1): 19-24.
2. El-Safî SH, Evans DA, 1989. A comparison of the DAT and ELISA in the serodiagnosis of leishmaniasis in the Sudan. Trans R.Soc Trop MedHyg, 83:334-337.
3. Ertabaklar H, Özensoy Töz S, Şakru N, Keleş E, Özbel Y, 2001. Muğla İli Göktepe Köyünde Çocuklarda ve Köpeklerde visseral leishmaniasisin araştırılması. T Parazitol Derg, 25(2): 128-131.
4. Ertuğ S, Aydın N, Gültekin B, Doyuran SE, 2002. Aydın bölgesindeki deri leishmaniasisi olgularının retrospektif incelenmesi. T Parazitol Derg, 26(2): 140-142.
5. Ferrer LM, 1999. Clinical spects of canine leishmaniasis. in: Canine leishmaniasis : an update. Proceedings of the International Canine Leishmaniasis Forum, Barcelona, Spain, p.6-10.
6. Gradoni L, 1995. Canine reservoir of zoonotic visceral leishmaniasis in the Mediterranean area. Epidemiol Control Inf Circ WHOMediterrZoon Control Cent, 37:12-13
7. Gürel MS, Ulukanhgil M, Özbilge H, 2002. Cutaneous leishmaniasis in Sanliurfa: epidemiologic and clinical features of the last four years (1997-2000). Int J Dermatol, 41:1-7.
8. Güven K, Ünal A, Kandemir O, Aygen B, Doğanay M, 1994. Kala-Azar: Üç Olgu Raporu. Mikrobiyol Bült 28(4): 378-384.
9. Harith AE, Slappendel RJ, Reiter I, van Knapen F, de Korte P, Huigen E, Kolk AHJ, 1989. Application of a direct agglutination test for detection of specific anti-Leishmania antibodies in the canine reservoir. J Clin Microbiol, 27:2252-2257.
10. Ibrahim ME, Smyth AJ, Ali MH, Barker DC, Kharazmi A, 1994. The polymerase chain reaction can reveal the occurence of naturally mixed infections with Leishmania parasites. Açta Trop, 57: 327-332.
11. Katakura K, Kawazu SI, Naya T, Nagakura K, Ito M, Aikawa M, Qu JQ, Guan LR, Zuo XP, Chai JJ, Chang KP, Matsumoto Y, 1998. Diagnosis of Kala-Azar by Nested PCR based on amplification of the Leishmania mini exon gene. J Clin Microbiol, 36(8): 2173-2177.
12. Lachaud L, Chabbert E, Dubessay P, Reynes J, Lamothe J, Bastien P, 2001. Comparison of various sample preparation methods for PCR diagnosis of visceral leishmaniasis using peripheral blood. J Clin Microbiol, 39(2): 613-617.
13. Lachaud L, Dereure J, Chabbert E, Reynes J, Mauboussin JM, Oziol E, Dedet JP, Bastein P, 2000. Optimized PCR using patient blood samples for diagnosis and follow-up of visceral leishmaniasis, with special reference to AIDS patients. J Clin Microbiol, 38(1): 236-240.
14. Le Fichoux Y, Quaranta JF, Aufeuvre JP, Lelievre A, Marty P, Suffia I, Rousseau D, Kubar J, 1999. Occurence of Leishmania infantum parasitemia in asymptomatic blood donors living in an area of endemicity in southern France. J Clin Microbiol, 37(6): 1953-1957. 15. Mathis A, Deplazes P, 1995. PCR and in vitro cultivation for detection of Leishmania spp. in diagnostic samples from human and dogs. J Clin Microbiol, 33(5): 1145-1149.
16. Mohammed AR, Wright EP, Rahmen AM, et al, 1986. Serodiagnosis of Sudanese VL and MCL: comparison of ELIS A-IFA and HA. Trans R Soc Trop MedHyg, 80:271-274.
17. Ok ÜZ, Balcıoğlu İC, Taylan Özkan A, Özensoy S, Özbel Y, 2002. Leishmaniasis in Turkey. Açta Trop, (baskıda).
18. Özbel Y, Turgay N, Ozensoy S, Ozbilgin A, Alkan MZ, Ozcel MA, Jaffe CL, Schnur L, Oskam L, Abranches P. 1995. Epidemiology, diagnosis and control of leishmaniasis in the Mediterranean region. Ann Trop MedParasitol, 89(Suppl.l):89-93.
19. Özbel Y, Oskam L, Özensoy S, Turgay N, Alkan MZ, Jaffe CL, Özcel MA, 1999. A survey on canine leishmaniasis in western Turkey by parasite, DNA and antibody detection assays. Açta Trop, 72(1): 1-6.
20. Özensoy S, Özbel Y, Turgay N, Alkan MZ, Gül K, Gilman- Sachs A, Chang K-P, Reed SG, Ozcel MA. 1998. Serodiagnosis and epidemiology of visceral leishmaniasis in Turkey. Am J Trop MedHyg, 59(3): 363-369.
21. Pearson RD, Queiroz de Sousa A, 1995. Leishmania species: Visceral (Kala-Azar) Cutaneous and Mucosal Leishmaniasis. Principles and Practice of Infectious Diseases, Eds. Mandell GL, Bennett JE, Dolin R. 4th Edi. Churchill Livingstone, p.2428-2442.
22. Piarroux R, Gambarelli F, Dumon H, Fontes M, Dunan S, Mary C, Toga B, Quilici M, 1994. Comparison of PCR with direct examination of bone marrow aspiration, myeloculture, and serology for diagnosis of visceral leishmaniasis in immuno- compromised patients. J Clin Microbiol, 32(3): 746-749. 23. Ramirez JS, Agudelo S, Muskus C, Alzate JF, Berberich Barker D, Velez ID, 2000. Diagnosis of cutanec leishmaniasis in Colombia: the sampling site within lesic influences the sensitivity of parasitologic diagnosis. J c Microbiol, 38(10): 3768-3773.
24. Reale S, Maxia L, Vitale F, Glorioso NS, Caracappa S, Ves G, 1999. Detection of Leishmania infantum in dogs by PCR wi lymph node aspirates and blood. J Clin Microbiol, 37(9): 293 2935.
25. Reithinger R, Quinnell RJ, Alexander B, Davies CR, 200 Rapid detection of Leishmania infantum infection in dog comparative study using an immunochromatograpic dipstic test, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, and PCR. J CL Microbiol, 40(7): 2352-2356.
26. Rodgers MR, Popper SJ, Wirth DF, 1990. Amplification c kinetoplast DNA as a tool in the detection and diagnosis c Leishmania. Exp Parasitol, 71:267-275.
27. Salotra P, Sreenivas G, Pogue GP, Lee N, Nakhasi H Ramesh V, Negi S, 2001. Development of a species-specifi PCR assay for detection of Leishmania donovani in clinica samples from patients with Kala-Azar and post Kala-Aza Dermal Leishmaniasis. J Clin Microbiol, 39(3): 849-854.
28. Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T, 1989. Moleculai Cloning. A Laboratory Manual, Edi. Nolan C. 2nd Edi. CSH Press, p.B20.
29. Smyth AJ, Ghosh A, Hassan MQ, Basu D, de Bruijn MHR, Adhya S, Mallik KK, Barker D, 1992. Rapid and sensitive detection of Leishmania kinetoplast DNA from spleen and blood samples of Kala-Azar patients. Parasitol, 105:183 -192.
30. Tokel NK, Sarıbaş S, Aksüyek Ç, 1992. Kala-Azarlı Yedi Çocuğun Tedavisi. Ankem Derg, 6(1): 71-74.
31. World Health Organization 1990 Control of Leishmaniasis. Technical report series no. 793. World Health Organization, Geneva, Switzerland.
32. Yaşarol Ş, 1955. A case report of canine visceral leishmaniasis in Istanbul. Tur J Microbiol, 8:1-9.

APA	TÖZ Ö, OZBEL Y, ATAY M, ERTABAKLAR H, SAKRU N, Taylan Ozkan A, HÖKELEK M (2002). İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. , 239 - 244.
Chicago	TÖZ Özensoy Seray,OZBEL YUSUF,ATAY Mediha Gül,ERTABAKLAR Hatice,SAKRU NERMİN,Taylan Ozkan Aysegul,HÖKELEK Murat İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. (2002): 239 - 244.
MLA	TÖZ Özensoy Seray,OZBEL YUSUF,ATAY Mediha Gül,ERTABAKLAR Hatice,SAKRU NERMİN,Taylan Ozkan Aysegul,HÖKELEK Murat İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. , 2002, ss.239 - 244.
AMA	TÖZ Ö,OZBEL Y,ATAY M,ERTABAKLAR H,SAKRU N,Taylan Ozkan A,HÖKELEK M İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. . 2002; 239 - 244.
Vancouver	TÖZ Ö,OZBEL Y,ATAY M,ERTABAKLAR H,SAKRU N,Taylan Ozkan A,HÖKELEK M İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. . 2002; 239 - 244.
IEEE	TÖZ Ö,OZBEL Y,ATAY M,ERTABAKLAR H,SAKRU N,Taylan Ozkan A,HÖKELEK M "İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması." , ss.239 - 244, 2002.
ISNAD	TÖZ, Özensoy Seray vd. "İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması". (2002), 239-244.

APA	TÖZ Ö, OZBEL Y, ATAY M, ERTABAKLAR H, SAKRU N, Taylan Ozkan A, HÖKELEK M (2002). İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. Türkiye Parazitoloji Dergisi, 26(3), 239 - 244.
Chicago	TÖZ Özensoy Seray,OZBEL YUSUF,ATAY Mediha Gül,ERTABAKLAR Hatice,SAKRU NERMİN,Taylan Ozkan Aysegul,HÖKELEK Murat İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. Türkiye Parazitoloji Dergisi 26, no.3 (2002): 239 - 244.
MLA	TÖZ Özensoy Seray,OZBEL YUSUF,ATAY Mediha Gül,ERTABAKLAR Hatice,SAKRU NERMİN,Taylan Ozkan Aysegul,HÖKELEK Murat İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. Türkiye Parazitoloji Dergisi, vol.26, no.3, 2002, ss.239 - 244.
AMA	TÖZ Ö,OZBEL Y,ATAY M,ERTABAKLAR H,SAKRU N,Taylan Ozkan A,HÖKELEK M İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. Türkiye Parazitoloji Dergisi. 2002; 26(3): 239 - 244.
Vancouver	TÖZ Ö,OZBEL Y,ATAY M,ERTABAKLAR H,SAKRU N,Taylan Ozkan A,HÖKELEK M İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması. Türkiye Parazitoloji Dergisi. 2002; 26(3): 239 - 244.
IEEE	TÖZ Ö,OZBEL Y,ATAY M,ERTABAKLAR H,SAKRU N,Taylan Ozkan A,HÖKELEK M "İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması." Türkiye Parazitoloji Dergisi, 26, ss.239 - 244, 2002.
ISNAD	TÖZ, Özensoy Seray vd. "İnsan ve köpeklerden alınan klinik örneklere Leishmaniasis tanısı için polimeraz zincir reaksiyonu (FZR) uygulanması". Türkiye Parazitoloji Dergisi 26/3 (2002), 239-244.