TY - JOUR TI - Structural and functional characterization of solution, gel, and aggregated forms of trypsin in organic solvent-assisted and pH-induced phase changes AB - Bu çalışmada alkol-su karışımlarında pH tarafından tetiklenen sığır pankreatik tripsin jelleşmesi ve agregasyonu faz değişiklikleri üzerine üç değişik fizikokimyasal değişkenin yapısal ve fonksiyonel etkileri çalışılmıştır.Metod: Tripsin jelleşmesi ters tüp metodu ile çalışılmıştır. Tripsin stabilitesi tripsin enzim aktivitesi tayiniyle çalışılmıştır. Protein ikinci yapı değişiklikleri FTIR spektroskopisi metodu ile gözlenmiştir. Jel ve agregat makroyapıları ve morfolojileri taramalı elektron mikroskopisi yöntemiyle incelenmiştir.Bulgular: NaOH ve CaCl2 eksikliğinde çözelti fazı gözlenmiştir. Jel fazı bu ikisinden birinin eksikliğinde gözlenmiştir. Agregat fazı ise bu iki ajanın birlikte varlığında tripsin konantrasyonuna bağlı olarak gözlenmiştir. Tripsin dayanıklılık çalışmaları jelleşmede yaklaşık olarak 53% ve agregasyonda ise 32% özgül aktivitede dayanıklılık kaybı göstermiştir. FTIR spektroskopisi çalışmalarında tripsin jel ve agregatlarında 1637 cm-1 daki ?-yaprağı bantının yok olduğu görülmüştür. 1651 cm-1 daki ?-heliks bantının güçlenmesi tripsin jel ve agregatlarındaki alfa helix artişına karşılık gelmektedir. Iodoasetamidin jelleşmeyi geciktirmesi jelleşmede moleküller arası disülfit bantlarının önemine işaret etmektedir. Sonuç: Tripsin jelleşmesinin protein yapısındaki denatüreasyondan kaynaklandığı görülmüştür. Jel oluşumu protein ikincil yapısında ?-yaprağı kaybına paralel olarak ?-heliks oluşumu ve moleküller arası disülfit bağlarının oluşumu ile gerçekleşmektedir AU - KARACİCEK, Bilge AU - Ceylan, Çağatay PY - 2015 JO - Türk Biyokimya Dergisi VL - 40 IS - 1 SN - 1303-829X SP - 81 EP - 87 DB - TRDizin UR - http://search/yayin/detay/206316 ER -