Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma
Yıl: 2018 Cilt: 42 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 11 - 19 Metin Dili: Türkçe DOI: 10.5152/tpd.2018.5554 İndeks Tarihi: 10-10-2019
Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma
Öz: Amaç: Kutanöz leishmaniasis (KL) tedavisinde ülkemizde antimon bileşiklerinden meglumin antimonat (Glucantime®, Fransa) ve sodyumstiboglukonat (Pentostam®, İngiltere) kullanılmaktadır. Çalışmamız, bu konuda çalışmalar planlayan genç araştırmacılara rehber olacak şekilde,in vitro ve in vivo modellerde ilaç direnç testlerinin ve etken madde taramalarının yapılmasına temel ve kaynak oluşturması amacıylaplanlanmıştır.Yöntemler: Bir KL izolatı sıvı nitrojenden çıkarıldıktan sonra internal transcribed spacer 1 (ITS1) problu gerçek-zamanlı polimeraz zincirlemereaksiyonu (PZR) testi uygulanarak genotiplendirilmiştir. Meglumin antimonat ve sodyum stiboglukonat’a karşı ilaç direncini belirlemek içinin vitro ve in vivo direnç testleri uygulanmıştır. In vitro ilaç direncini araştırmak için hemositometre ve XTT (sodium 3,39-[1-(phenylaminocarbonyl)-3,4-tetrazolium]-bis (4-methoxy-6-nitro) benzene sülfonik asit hidrat) yöntemleri, in vivo ilaç direncini araştırmak için ise farelerde KLmodelleri kullanılmıştır.Bulgular: Kullanılan izolatın PZR ile ITS1 bölgesine göre yapılan genotiplendirmeyle Leishmania tropica olduğu saptanmıştır. In vitro ilaçdirenç testlerinde meglumin antimonat’a göre sodyum stiboglukonat’ın daha etkili olduğu görülmüş fakat istatistiksel olarak belirgin bir farkgörülmemiştir (p>0,05). In vivo çalışmalarda ise meglumin antimonat ve sodyum stiboglukonat tedavisinin ayaktaki lezyonları enfeksiyonun 5.haftadan sonra küçültmeye başladığı ve 3 ay sonunda her iki ilacın uygulandığı gruplarda klinik ve parazitolojik iyileşme olduğu görülmüştür.Sonuç: Çalışacak genç araştırmacılar için rehber niteliğinde olacak şekilde in vitro ve in vivo modelde ilaç direnç testleri ve etken maddetarama yöntemleri temel ve basit olarak verilmiştir.
Anahtar Kelime: Konular:
Evaluation of In vitro and In vivo Drug Efficacy Over Leishmania tropica: A Pilot Study
Öz: Objective: Two pentavalent antimonials, meglumine antimoniate (Glucantime®, France) and sodium stibogluconate (Pentostam®, England), are used to treat cutaneous leishmaniasis (CL) in Turkey. The present study, serving as a guidebook for young researchers, aims to provide basis for conducting drug resistance tests and active ingredient scanning in in vitro and in vivo models. Methods: A CL isolate kept in liquid nitrogen was initially thawed and genotyped by real-time polymerase chain reaction (PCR) using ITS1 prob. In vitro and in vivo tests were conducted to determine drug resistance against meglumine antimoniate and sodium stibogluconate. Hemocytometry and XTT (sodium 3,39-[1-(phenylaminocarbonyl)-3,4-tetrazolium]-bis (4-methoxy-6-nitro) Benzenesulfonic acid hydrate) methods were used to investigate in vitro drug resistance. CL mouse models were used to analyze in vivo drug resistance. Results: The isolate was determined as Leishmania tropica by genotyping by PCR on the internal transcribed spacer 1 (ITS1) gene region. In in vitro drug resistance tests, sodium stibogluconate was observed to be more effective than meglumine antimoniate, but there was no statistically significant difference between the two (p>0.05). It was observed that the footpad lesions of the animals started to shrink afterward the 5th week of infection following treatment with these agents, and parasitologic recovery was observed at the end of 3 months. Conclusions: With an aim to be used as a guidebook for young researchers, active ingredient scanning and drug resistance tests in both in vitro and in vivo models were presented in the current study.
Anahtar Kelime: Konular:
Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Erişime Açık
- 1. WHO Technical Report Series-949. Report of a meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniases, Geneva, 22–26 March 2010.
- 2. Desjeux P. Leishmaniasis: current situation and new perspectives. Comp Immunol Microb 2004; 27: 305-18. [CrossRef]
- 3. Alvar J, Canavate C, Gutierrez-Solar B, Jimenez M, Laguna F, Lopez- Velez R, et al. Leishmania and human immunodeficiency virus co-infection: the first 10 years. Clin Microbiol Rev 1997; 10: 298-319.
- 4. WHO Web Sayfası. Available from: http://www.who.int/tdr/diseases/ leish/default.
- 5. Özbel Y, Özensoy Töz S. Leishmaniosis. Özcel MA, Özbel Y, Ak M, editörler. Tıbbi Parazit Hastalıkları. İzmir: Türkiye Parazitoloji Derneği; 2007. s. 197-241.
- 6. Bayram Delibaş S, Akısü Ç. Diğer Kan ve Doku Protozoon Hastalıklarının Tedavisi. Akısü Ç, Korkmaz M, editörler. Tıbbi Parazitolojide Tedavi. İzmir: Türkiye Parazitoloji Derneği Yayın No: 20; 2005. s. 87-110.
- 7. Özensoy Töz S. Pentavalan antimoniyaller. Akısü Ç, Korkmaz M, editörler. Tıbbi Parazitolojide Tedavi. İzmir: Türkiye Parazitoloji Derneği Yayın No: 20; 2005. s. 209-18.
- 8. Jackson JE, Tally JD, Ellis WY, Mebrahtu YB, Lawyer PG, Were JB, et al. Quantitative in vitro drug potency and drug susceptibility evaluation of Leishmania ssp. From patients unresponsive to pentavalent antimony therapy. Am J Trop Med Hyg 1990, 43: 464-80.
- 9. Rojas R, Valderrama L, Valderrama M, Varona MX, Ouellette M, Saravia NG. Resistance to antimony and treatment failure in human Leishmania (viannia) infection. J Infect Dis 2006; 193: 1375-83. [CrossRef]
- 10. Yardley V, Ortuno N, Llanos-Cuentas A, Chappuis F, Doncker SD, Ramirez L, et al. American tegumentary leishmaniasis: is antimonial treatment outcome related to parasite drug susceptibility? J Infect Dis 2006; 194: 1168-75.
- 11. Carrio J, Riera C, Gallego M, Ribera E, Portus M. In vitro susceptibility of Leishmania infantum to meglumine antimoniate in isolates from repeated leishmaniasis episodes in HIVcoinfected patients. J Antimicrob Chemother 2001; 47: 120-1. [CrossRef]
- 12. Faraut-Gambarelli F, Piarroux R, Deniau M, Giusiano B, Marty P, Michael G, et al. In vitro and in vivo resistance of Leishmania infantum to meglumine antimoniate: a study of 37 strains collected from patients with visceral leishmaniasis. Antimicrob Agents Chemother 1997, 41: 827-30.
- 13. Hadighi R, Mohebali M, Boucher P, Hajjaran H, Khamesipour A, Ouellette M. Unresponsiveness to Glukantim treatment in Iranian cutaneous leishmaniasis due to drug-resistant Leishmania tropica parasites. PLoS Med 2006; 3: e162.
- 14. Hadighi R, Boucher P, Khamesipour A, Meamar AR, Roy G, Ouellette M, et al. Glukantim-resistant Leishmania tropica isolated from Iranian patients with cutaneous leishmaniasis are sensitive to alternative antileishmania drugs. Parasitol Res 2007; 101: 1319-22. [CrossRef]
- 15. Das VN, Ranjan A, Bimal S, Siddique NA, Pandey K, Kumar N, et al. Magnitude of unresponsiveness to sodium stibogluconate in the treatment of visceral leishmaniasis in Bihar. Natl Med J India 2005; 18: 131-3.
- 16. Lira R, Sundar S, Makharia A, Kenney R, Gam A, Saraiva E, et al. Evidence that the high incidence of treatment failures in Indian kala-azar is due to the emergence of antimony-resistant strains of Leishmania donovani. J Infect Dis 1999; 180: 564-7. [CrossRef]
- 17. Sundar S, More DK, Singh MK, Singh VP, Sharma S, Makharia A, et al. Failure of pentavalent antimonyvin visceral leishmaniasis in India: report from the Center of the Indian Epidemic. Clin Infect Dis 2000; 31: 1104-7. [CrossRef]
- 18. Thakur CP, Narayan S, Ranjan A. Epidemiological, clinical pharmacological study of antimony-resistant visceral leishmaniasis in Bihar, India. Indian J Med Res 2004; 120: 166-72.
- 19. Olliaro PL, Guerin PJ, Gerstl S, Haaskjold AA, Rottingen JA, Sundar S. Treatment options for visceral leishmaniasis: a systematic review of clinical studies done in India, 1980-2004. Lancet Infect Dis 2005; 5: 763-74. [CrossRef]
- 20. Croft SL, Sundar S, Fairlamb AH. Drug resistance in leishmaniasis. Clin Microbiol Rev 2006; 19: 111-26. [CrossRef]
- 21. Kayaalp OS. Klinik öncesi değerlendirmesi. Klinik Farmakolojinin Esasları ve Temel Düzenlemeler. 4.Baskı. Ankara: Faryal Matbaacılık; 2008. s. 29-46.
- 22. Ozbilgin A, Durmuskahya C, Kayalar H, Ertabaklar H, Gunduz C, Ostan Ural I, et al. Antileishmanial Activity of Selected Turkish Medicinal. Tropical Journal of Pharmaceutical Research 2014; 13: 1319-26.
- 23. El Tai NO, Osman OF, El Fari M, Presber W, Schönian G. Genetic heterogeneity of ribosomal internal transcribed spacer in clinical samples of L. donovani spotted on filter paper as revealed by single- strand conformation polymorphisms and sequencing. Trans R Soc Trop Med Hyg 2000; 94: 575-9. [CrossRef]
- 24. Toz SO, Culha G, Zeyrek FY, Ertabaklar H, Alkan MZ, Vardarlı AT, et al. A real-time ITS1-PCR based method in the diagnosis and species identification of Leishmania parasite from human and dog clinical samples in Turkey. PLoS Negl Trop Dis 2013; 7: e2205.
- 25. Williams C, Espinosa O, Montenegro H, Cubilla L, Capson TL, Ortega-Barria E, et al. Hydrosoluble formazan XTT: its application to natural products drug discovery for Leishmania. J Microbiol Methods 2003; 55: 813-6. [CrossRef]
- 26. Yardley V, Croft SL. Animal Models of Cutaneous Leishmaniasis, Handbook of Animal Models of Infection. Zak O, Sande AM, editors. Newyork: Acedemic Pres; 1999. s. 775-81.
- 27. Girginkardeşler N, Balcıoğlu C, Yereli K, Özbilgin A, Özbel Y. Cutaneous leishmaniasis infection in Balb/c mice using a Leishmania tropica strain isolated fromTurkey. J Parasitol 2001; 87: 1177-8. [CrossRef]
- 28. Croft SL, Yardley V. Chemotherapy of leishmaniasis. Curr Pharm Des 2002; 8: 319-42.[CrossRef]
- 29. Berman J. Current treatment approaches to leishmaniasis. Curr Opin Infect Dis 2003; 16: 397-401. [CrossRef]
- 30. Östan I, Sağlam H, Limoncu ME, Ertabaklar H, Özensoy Toz S, Özbel Y, et al. In vitro and in vivo activities of Haplophyllum myrtifolium against Leishmania tropica. New Microbiologica 2007; 30: 439-45.
- 31. Ozbilgin A, Durmuskahya C, Kayalar H, Ertabaklar H, Gunduz C, Ostan Ural I, et al. Antileishmanial Activity of Selected Turkish Medicinal Plants. Tropical Journal of Pharmaceutical Research 2014; 13: 1319-26.
- 32. Limoncu ME, Eraç B, Gürpınar T, Özbilgin A, Balcıoğlu İC, Hoşgör- Limoncu M. Investigation of in vitro Antileishmanial Activity of Moxifloxacin, Linezolid and Caspofungin on Leishmania tropica Promastigotes. Turkiye Parazitol Derg 2013; 37: 1-3. [CrossRef]
- 33. Carvalho PB, Ferreira EI. Leishmaniasis phytotherapy. Nature’s leadership against an ancient disease-review. Fitoterapia 2001; 72: 599-618. [CrossRef]
- 34. Kayser O, Kiderlen AF. In vitro leishmanicidal activity of naturally occurring chalcones. Phytother Res 2001; 15: 148-52. [CrossRef]
- 35. Rocha LG, Almeida JR, Macedo RO, Barbosa-Filho JM. A review of natural products with antileishmanial activity. Phytomedicine 2005; 12: 514-35.
- 36. Bhadra R. Antileishmanial agents. Drugs Future 1993; 18: 451-63. 37. Weniger B, Robledo S, Arango GJ, Deharo E, Aragon R, Munoz V, et al. Antiprotozoal activities of Colombian plants. J Ethnopharmacol 2001; 78: 193-200. [CrossRef]
- 38. Carvalho PB, Arribas MAG, Ferreira EI. Leishmaniasis. What do we know about its chemotherapy? Rev Bras Ci Farm 2000; 36: 69-96.
- 39. Shokri A, Sharifi I, Khamesipour A, Nakhaee N, Fasihi Harandi M, Nosratabadi J, et al. The effect of verapamil on in vitro susceptibility of promastigote and amastigote stages of Leishmania tropica to meglumine antimoniate. Parasitol Res 2012; 110: 1113-7. [CrossRef]
- 40. Dube A, Singh N, Sundar S, Singh N. Refractoriness to the treatment of sodium stibogluconate in Indian kala-azar field isolates persist in in vitro and in vivo experimental models. Parasitol Res 2005; 96: 216-23. [CrossRef]
- 41. Solgi G, Kariminia A, Abdi K, Darabi M, Ghareghozloo B. Effects of combined therapy with thalidomide and glucantime on leishmaniasis induced by Leishmania major in BALB/c mice. Korean J Parasitol 2006; 44: 55-61. [CrossRef]
- 42. Zamani Sorkhroodi F, Alavi Naeini AM, Zahraei Ramazani AR, Aghaye Ghazvini MR, Mohebali M, Keshavarz SA. Therapeutic Effect of Sodium Selenite and Zinc Sulphate as Supplementary with Meglumine Antimoniate (Glucantime®) Against Cutaneous Leishmaniasis In BALB/C Mice. Iranian J Parasitol 2010; 5: 11-9.
- 43. Kalat SA, Khamesipour A, Bavarsad N, Fallah M, Khashayarmanesh Z, Feizi E, et al. Use of topical liposomes containing meglumine antimoniate (Glucantime) for the treatment of L. major lesion in BALB/c mice. Exp Parasitol 2014; 143: 5-10.
| APA | Ozbilgin A, çavuş i, YILDIRIM A, KAYA T, ERTABAKLAR H (2018). Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. , 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| Chicago | Ozbilgin Ahmet,çavuş ibrahim,YILDIRIM Ahmet,KAYA TUGBA,ERTABAKLAR Hatice Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. (2018): 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| MLA | Ozbilgin Ahmet,çavuş ibrahim,YILDIRIM Ahmet,KAYA TUGBA,ERTABAKLAR Hatice Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. , 2018, ss.11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| AMA | Ozbilgin A,çavuş i,YILDIRIM A,KAYA T,ERTABAKLAR H Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. . 2018; 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| Vancouver | Ozbilgin A,çavuş i,YILDIRIM A,KAYA T,ERTABAKLAR H Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. . 2018; 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| IEEE | Ozbilgin A,çavuş i,YILDIRIM A,KAYA T,ERTABAKLAR H "Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma." , ss.11 - 19, 2018. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| ISNAD | Ozbilgin, Ahmet vd. "Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma". (2018), 11-19. https://doi.org/10.5152/tpd.2018.5554 |
| APA | Ozbilgin A, çavuş i, YILDIRIM A, KAYA T, ERTABAKLAR H (2018). Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. Türkiye Parazitoloji Dergisi, 42(1), 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| Chicago | Ozbilgin Ahmet,çavuş ibrahim,YILDIRIM Ahmet,KAYA TUGBA,ERTABAKLAR Hatice Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. Türkiye Parazitoloji Dergisi 42, no.1 (2018): 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| MLA | Ozbilgin Ahmet,çavuş ibrahim,YILDIRIM Ahmet,KAYA TUGBA,ERTABAKLAR Hatice Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. Türkiye Parazitoloji Dergisi, vol.42, no.1, 2018, ss.11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| AMA | Ozbilgin A,çavuş i,YILDIRIM A,KAYA T,ERTABAKLAR H Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. Türkiye Parazitoloji Dergisi. 2018; 42(1): 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| Vancouver | Ozbilgin A,çavuş i,YILDIRIM A,KAYA T,ERTABAKLAR H Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma. Türkiye Parazitoloji Dergisi. 2018; 42(1): 11 - 19. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| IEEE | Ozbilgin A,çavuş i,YILDIRIM A,KAYA T,ERTABAKLAR H "Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma." Türkiye Parazitoloji Dergisi, 42, ss.11 - 19, 2018. 10.5152/tpd.2018.5554 |
| ISNAD | Ozbilgin, Ahmet vd. "Leishmania tropica Üzerinde In vitro ve In vivo İlaç Etkinliğinin Değerlendirilmesi: Pilot Çalışma". Türkiye Parazitoloji Dergisi 42/1 (2018), 11-19. https://doi.org/10.5152/tpd.2018.5554 |
