İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması

KUŞTİMUR, Semra; DOĞRUMAN, AL Funda; TÜRK, Songül; koloren, zeynep

İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması

Songül TÜRK, (Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Ankara, Türkiye)

AL Funda DOĞRUMAN, (Gazi Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Ankara, Türkiye)

ÜLKÜ KARAMAN, (Ordu Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Ordu, Türkiye)

Semra KUŞTİMUR (Gazi Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Ankara, Türkiye)

Mikrobiyoloji Bülteni

8 0

Yıl: 2012 Cilt: 46 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 85 - 92 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması

Öz:

Microsporidia, türüne bağlı olarak, genellikle kendiliğinden iyileşen ishal, kornea ülseri ve miyozit gibi semptomlarla karakterize sporadik olgulara neden olmaktadır. İnsan immünyetmezlik virusu ile enfekte hastalarda fırsatçı patojen olarak değerlendirilmekle birlikte, Microsporidia türleri son yıllarda immün sistemi normal bireylerde de ishal etkenleri arasında yer almaya başlamıştır. Microsporidia enfeksiyonlarının tanısı, dışkı, idrar, sinüs aspiratları, nazal akıntı, bronkoalveoler lavaj veya doku biyopsilerinde, parazit sporlarının veya evrim dönemlerinin görülmesiyle konulur. Tanıda boya yöntemleri, serolojik yöntemler, polimeraz zincir reaksiyonu ve elektron mikroskobu kullanılmaktadır. Bu çalışmada, Mart 2009-Haziran 2009 tarihleri arasında Gazi Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesine başvuran ishalli hastalardan Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Laboratuvarına gönderilen dışkı örneklerinde üç farklı boyama yöntemi kullanılarak Microsporidia sıklığının araştırılması ve bu yöntemlerin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Çalışmada, 225 ishalli hastaya (84ü çocuk, 141i erişkin; 103ü kadın, 122si erkek) ait dışkı örneği Weberin modifiye trikrom (MTS) boyaması, kalkoflor (calcofluor; CF) boyama ve akridin turuncusu (Acridine orange; AO) boyama yöntemleriyle boyanarak Microsporidia açısından incelenmiştir. Araştırmada, ishalli hastaların %9.8 (22/225)inde Microsporidia varlığı saptanmış; bu oranın çocuk yaş grubunda %9.5 (8/84), erişkinlerde %9.9 (14/141) olduğu belirlenmiştir. Erişkin-çocuk yaş grupları ve kadın-erkek cinsiyetleri arasında Microsporidia görülmesi açısından istatistiksel olarak anlamlı fark bulunmamıştır (p> 0.05). Boyama yöntemlerinin karşılaştırmasında MTS yöntemi referans alındığında, AO yönteminin duyarlılık, özgüllük ve tutarlılık oranları sırasıyla %100, %91.6 ve %92 olarak saptanmış; bu değerler CF yöntemi için sırasıyla %95.4, %99.5 ve %99.1 olarak belirlenmiştir. CF boyama ile MTS arasında çok güçlü ve anlamlı bir korelasyon (r= 0.950, p< 0.001) saptanırken, AO ile korelasyon güçlü ve anlamlı (r= 0.719, p< 0.001) olarak izlenmiştir. AO yönteminde boyalı preparatın zemininin de turuncu renge boyanması ve boya artıklarının ortamda yoğun bulunması yorumlamada güçlük oluşturmuş, hızlı ve pratik bir yöntem olmasına rağmen pozitif prediktif değeri düşük (%56.4) olarak saptanmıştır. Sonuç olarak çalışmamızda, ishalli olguların dışkı örneklerinin Microsporidia açısından da araştırılması gerektiği kanısına varılmış ve rutin laboratuvarlarda MTS yöntemiyle birlikte CF boyama yönteminin kullanılmasının, Microsporidia tanısındaduyarlılığı ve güvenilirliği artıracağı sonucuna ulaşılmıştır.

Anahtar Kelime: İshal Tanı Boyama ve işaretleme Microsporidia

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik

1. Ok ÜZ, Limoncu ME. Microsporidiosis, s: 397-409. Özcel MA (ed), Özcelin Tıbbi Parazit Hastalıkları. 2007. Meta Basım, İzmir.
2. Garcia LS. Intestinal protozoa (coccidia and microsporidia), pp: 57-101. In: Diagnostic Medical Parasitology. 2007, $5^ {th}$ ed. ASM Press, Washington, DC.
3. Didier ES. Microsporidiosis: current status. Curr Opin Infect Dis 2006; 19(5): 485-92.
4. Weber R, Bryan RT, Schwartz DA, Owen RL. Human microsporidial infections. Clin Microbiol Rev 1994; 7(4): 426-61.
5. Joseph J, Vemuganti GK, Sharma S. Microsporidia: emerging ocular pathogens. Indian J Med Microbiol 2005; 23(2): 80-91.
6. Sancak B, Akyön Y. Microsporidia: genel özellikleri, enfeksiyonları ve laboratuvar tanısı. Mikrobiyol Bul 2005; 39(4): 513-22.
7. Aksoy Ü, Usluca S. Microsporidiosis ve immunolojisi, s: 102-20. Özcel MA, İnci A, Tugay N, Köroğlu E (ed), Tıbbi ve Veteriner İmmunoparazitoloji. 2007. Meta Basım, İzmir.
8. Franzen C, Müller A. Molecular techniques for detection, species differentiation and analysis of Microsporidia. Clin Microbiol Rev 1999; 12(2): 243-85.
9. Joseph J, Vemuganti GK, Garg P, Sharma S. Histopathological evalution of ocular microsporidiosis by different stains. BMC Clin Pathol 2006; 6: 6.
10. Field AS, Hing MC, Milliken ST, Marriott DJ. Microsporidia in the small intestine of HIV-infected patients: a new diagnostic technique and a new species. Med J Aust 1993; 158(6): 390-4.
11. Bretagne S, Foulet F, Alkassoum W, Fleury-Feith J, Develoux M. Prevalence of Enterocytozoon bieneusi spores in the stool of AIDS patients and African children not infected by HIV. Bull Soc Pathol Exot 1993; 86(5):351-7.
12. Tumwine JK, Kekitiinwa A, Nabukeera N, Akiyoshi DE, Buckholt MA, Tzipori S. Enterocytozoon bieneusi among children with diarrhea attending Mulago Hospital in Uganda. Am J Trop Med Hyg 2002; 67(3):299-303.
13. Dworkin MS, Buskin SE, Davidson AJ, et al. Prevalence of intestinal microsporidiosis in human immunodeficiency virus-infected patients with diarrhea in major United States cities. Rev Inst Med Trop S Paulo 2007; 49(6): 339-42.
14. Espern A, Morio F, Miegeville M, et al. Molecular study of microsporidiosis due to Enterocytozoon bieneusi and Encephalitozoon intestinalis among human immunodeficiency virus-infected patients from two geographical areas: Niamey, Niger, and Hanoi, Vietnam. J Clin Microbiol 2007; 45(9): 2999-3002.
15. Sak B, Kucerova Z, Kvac M, Kvetonova D, Rost M, Secor EW. Seropositivity for Enterocytozoon bieneusi, Czech Republic. Emerg Infect Dis 2010; 16(2): 335-7.
16. Karaman Ü, Daldal N, Atambay M, Çolak C. The epidemiology of microsporidiasis in humans (Malatya sample). Turk J Med Sci 2009; 39(2): 281-8.
17. Atambay M, Karaman U, Daldal N, Çolak C. İnönü Üniversitesi Turgut Özal Tıp Merkezi Parazitoloji Laboratuvarına gelen erişkin hastalarda microsporidium görülme sıklığı. Turkiye Parazitol Derg 2008; 32(2): 113-5.
18. Karaman U, Atambay M, Daldal N, Çolak C. Kanser tanısı almış hastalarda Microsporidium görülme sıklığı. Turkiye Parazitol Derg 2008; 32(2): 109-12.
19. Karaman Ü, Şener S, Çalık S, Şaşmaz S. Akut ve kronik ürtikerli hastalarda Microsporidia pozitiflik oranı. Mikrobiyol Bul 2011; 45(1): 168-73.
20. Calık S, Karaman U, Colak C. Prevalence of Microsporidium and other intestinal parasites in children from Malatya, Turkey. Indian J Microbiol 2011; 51(3): 345-9.
21. Yazar S, Eser B, Yalçın Ş, Şahin İ, Koç AN. A case of pulmonary microsporidiasis in an acute myeloblastic leukemia (AML)-M3 patient. Yonsei Med J 2003; 44(1): 146-9.
22. Usluca S, Aksoy Ü. İmmün sistemi baskılanmış bir çocukta Microsporidium spp. enfeksiyonunun polimeraz zincir reaksiyonu ile tanımlanması. Mikrobiyol Bul 2010; 44(4): 679-83.
23. Tuli L, Singh DK, Gulati AK, Sundar S, Mohapatra TM. A multiattribute utility evaluation of different methods for the detection of enteric protozoa causing diarrhea in AIDS patients. BMC Microbiol 2010; 10: 11.
24. Luna VA, Stewart BK, Bergeron DL, Clausen CR, Plorde JJ, Fritsche TR. Use of the fluorochrome calcofluor white in the screening of stool specimens for spores of microsporidia. Am J Clin Pathol 1995; 103(5): 656-9.
25. Didier ES, Orenstein JM, Aldras A, Bertucci D, Rogers LB, Janney FA. Comparison of three staining methods for detecting microsporidia in fluids. J Clin Microbiol 1995; 33(12): 3138-45.
26. Carter PL, Macpherson DW, Mckenzıe RA. Modi_ed technique to recover microsporidian spores in sodium acetate-acetic acid-formalin-fixed fecal samples by light microscopy and correlation with transmission electron microscopy. J Clin Microbiol 1996; 34(11): 2670-3.
27. Notermans DW, Peek R, de Jong MD, Wentink-Bonnema EM, Boom R, van Gool T. Detection and identification of Enterocytozoon bieneusi and Encephalitozoon species in stool and urine specimens by PCR and differential hybridization. J Clin Microbiol 2005; 43(2): 610-4.
28. Green LC, LeBlanc PJ, Didier ES. Discrimination between viable and dead Encephalitozoon cuniculi (Microsporidian) spores by dual staining with sytox green and calco_uor white M2R. J Clin Microbiol 2000; 38(10):3811-4.

APA	TÜRK S, DOĞRUMAN A, koloren z, KUŞTİMUR S (2012). İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. , 85 - 92.
Chicago	TÜRK Songül,DOĞRUMAN AL Funda,koloren zeynep,KUŞTİMUR Semra İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. (2012): 85 - 92.
MLA	TÜRK Songül,DOĞRUMAN AL Funda,koloren zeynep,KUŞTİMUR Semra İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. , 2012, ss.85 - 92.
AMA	TÜRK S,DOĞRUMAN A,koloren z,KUŞTİMUR S İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. . 2012; 85 - 92.
Vancouver	TÜRK S,DOĞRUMAN A,koloren z,KUŞTİMUR S İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. . 2012; 85 - 92.
IEEE	TÜRK S,DOĞRUMAN A,koloren z,KUŞTİMUR S "İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması." , ss.85 - 92, 2012.
ISNAD	TÜRK, Songül vd. "İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması". (2012), 85-92.

APA	TÜRK S, DOĞRUMAN A, koloren z, KUŞTİMUR S (2012). İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, 46(1), 85 - 92.
Chicago	TÜRK Songül,DOĞRUMAN AL Funda,koloren zeynep,KUŞTİMUR Semra İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni 46, no.1 (2012): 85 - 92.
MLA	TÜRK Songül,DOĞRUMAN AL Funda,koloren zeynep,KUŞTİMUR Semra İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.46, no.1, 2012, ss.85 - 92.
AMA	TÜRK S,DOĞRUMAN A,koloren z,KUŞTİMUR S İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2012; 46(1): 85 - 92.
Vancouver	TÜRK S,DOĞRUMAN A,koloren z,KUŞTİMUR S İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2012; 46(1): 85 - 92.
IEEE	TÜRK S,DOĞRUMAN A,koloren z,KUŞTİMUR S "İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması." Mikrobiyoloji Bülteni, 46, ss.85 - 92, 2012.
ISNAD	TÜRK, Songül vd. "İshalli olgularda Microsporidia sıklığının farklı boyama yöntemleriyle araştırılması". Mikrobiyoloji Bülteni 46/1 (2012), 85-92.