Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması

irvem, arzu; BOR, Emire; AKSARAY, Sabahat; YÜCEL, Fatma Muhterem

Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması

Arzu İRVEM, (Ümraniye Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Mikrobiyoloji Laboratuvarı, İstanbul, Türkiye)

Fatma Muhterem YÜCEL, (Ümraniye Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Mikrobiyoloji Laboratuvarı, İstanbul, Türkiye)

Sabahat AKSARAY, (Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Mikrobiyoloji Laboratuvarı, İstanbul, Türkiye)

Emire BOR (Ümraniye Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Biyoistatistik Uzmanı, İstanbul, Türkiye)

Mikrobiyoloji Bülteni

30 0

Yıl: 2015 Cilt: 49 Sayı: 2 Sayfa Aralığı: 181 - 187 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması

Öz:

Brusellozun tanısı temel olarak, kan ve/veya kemik iliği kültürü ile serumda yüksek titrede özgül antikor tespiti veya serokonversiyonun gösterilmesine dayanır. Hastalığın rutin serolojik tanısında, Rose Bengal testi ile tarama yapılmakta, pozitif bulunan örnekler standart tüp aglütinasyon (STA) testi ile dilüsyonlu olarak çalışılmaktadır. Ancak blokan antikorların varlığı nedeniyle STA testinde yalancı negatif sonuçlar alınabileceğinden, bu testin Coombs anti-Brucella (CAB) veya yakalamalı aglütinasyon (Immunocapture agglutination; ICA) testleriyle doğrulanması gerekmektedir. Son yıllarda ülkemizde geliştirilen Brucella Coombs jel testi ise (ODAK Brucella Coombs Gel Test, Toprak Medikal, İstanbul), aglütinasyon esasına dayanan yeni ve hızlı bir yöntem olarak kullanıma sunulmuştur. Bu test, Coombs antikorları içeren jel matriksin bulunduğu kuyucuklarda gerçekleştirilmekte ve sonuçlar iki saat içinde görsel olarak değerlendirilmektedir. Bu çalışmada, brusellozun serolojik tanısında Brucella Coombs jel testinin (BCGT) etkinliğinin, STA, CAB ve ICA yöntemleriyle karşılaştırılarak belirlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmaya, Ocak 2012- Ağustos 2013 tarihleri arasında laboratuvarımıza gönderilen bruselloz şüpheli olguların serum örneklerinden, CAB testi (Seromed, İstanbul) ile yüksek pozitif (≥ 1/160) bulunan 31; düşük pozitif (≤ 1/80) bulunan 23 ve negatif bulunan 46 örnek olmak üzere toplam 100 örnek dahil edilmiştir. Tüm örnekler, STA (Seromed, İstanbul), ICA (Vircell, İspanya) ve BCGT (İslab, İstanbul) yöntemleriyle titrasyonlu olarak çalışılmıştır. STA, CAB ve BCGT testleri ile ≥ 1/160, ICA testi ile ≥ 1/320 olarak saptanan titreler pozitif olarak kabul edilmiştir. Testler arasındaki uyum Cohen kappa (κ) analizi ile değerlendirilmiştir. Çalışmamızda, örneklerin yedisi STA ile, 30u ICA ile, 32si ise BCGT ile pozitif bulunmuş; 28 örnek her üç yöntem ile de pozitif olarak saptanmıştır. CAB ve BCGT pozitif iki örnekte ICA düşük titre/negatif; ICA ve BCGT pozitif bir örnekte CAB düşük titre/negatif; CAB ve BCGT düşük titre/negatif olan bir örnekte ise ICA pozitif sonuç vermiştir. STA testi, pozitifl ik oranının çok düşük olması nedeniyle kappa analizine dahil edilmemiş; diğer yöntemler arasında ise mükemmel uyum saptanmıştır (CAB ile ICA için κ= 0.887, CAB ile BCGT için κ= 0.977, ICA ile BCGT için κ= 0.907). Sonuç olarak çalışmamızda, BCGT yönteminin hem CAB hem de ICA testleriyle mükemmel uyum gösterdiği; testin uygulamasının pratik olduğu; iki saat gibi kısa bir zamanda sonuç verdiği ve değerlendirmenin görsel açıdan diğer yöntemlere göre daha kolay olduğu belirlenmiştir. BCGT rutin çalışmalar için önerilebilmekle birlikte, daha fazla sayıda olgu ve kontrol örneklerini içeren geniş kapsamlı çalışmalarla özgüllük ve duyarlılığının ortaya konulması gerektiği düşünülmüştür.

Anahtar Kelime:

Konular: Mikrobiyoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Viroloji Enfeksiyon Hastalıkları

Comparison of a New and Rapid Method, Brucella Coombs Gel Test With the Other Methods in the Serological Diagnosis of Brucellosis

Öz:

Diagnosis of brucellosis basically depends on blood and/or bone marrow culture and demonstration of high titer specifi c antibody or seroconversion in serum. In routine serological diagnosis of the disease, after screening with Rose Bengal test, the positive samples are studied with standart tube agglutination (STA) test with serial dilutions. However false negative results can be seen in STA test due to the existence of blocking antibodies, this test should be verifi ed with Coombs anti-Brucella (CAB) or immunocapture agglutination (ICA) tests. In recent years Brucella Coombs gel test (ODAK Brucella Coombs Gel Test, Toprak Medikal, Turkey) developed in our country, was available as a new and rapid agglutination based method. The test is performed in vials that contain Coombs antibodies within gel matrix and results are evaluated visually within two hours.The aim of this study was to compare the effi cacy of Brucella Coombs gel test (BCGT) with STA, CAB and ICA methods in serological diagnosis of brucellosis. A total of 100 serum samples with suspected brucellosis sent to our laboratory between January 2012-August 2013 in which 31 high positive (≥ 1/160), 23 low positive (≤ 1/80) and 46 negative samples diagnosed with CAB test (Seromed, Turkey) were included in the study. All the samples were studied using titrations with STA (Seromed, Turkey), ICA (Vircell, Spain) and BCGT (Islab, Turkey) methods. With STA, CAB and BCGT tests ≥ 1/160, with ICA test ≥ 1/320 were accepted as positive titers. The correlation between the tests were evaluated with Cohen s kappa (κ) analysis. In our study, seven of the samples yielded positive results with STA, 30 with ICA, and 32 with BCGT. The number of the sera which yielded positive results with all three methods was 28. Two samples positive with CAB and BCGT resulted low titer/negative with ICA, one sample positive with ICA and BCGT resulted low titer/negative with CAB, and one low titer/negative sample with CAB and BCGT yielded positive with ICA test. STA test was not included in the statistical evaluation due to its very low positivity rate. According to the kappa analysis, almost perfect agreement was detected between the other methods (κ= 0.887 for CAB and ICA, κ= 0.977 for CAB and BCGT, κ= 0.907 for ICA and BCGT). In conclusion, BCGT method showed excellent correlation with both CAB and ICA tests; the application of the test was practical; resulted in a short time such as two hours and visually evaluation was determined to be practical compared to other methods. Although BCGT can be recommended for routine diagnostics, evaluation of specifi city and sensitivity with comprehensive studies including a greater number of cases and control samples should be considered.

Anahtar Kelime:

Konular: Mikrobiyoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Viroloji Enfeksiyon Hastalıkları

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik

1. Pappas G. Akritidis N, Bosilkovski M, Tsianos E. Brucellosis. N Engl J Med 2005; 352(22): 2325-36.
2. Dean AS, Crump L, Greter H, Schelling E, Zinsstag J. Global burden of human brucellosis: a systematic review of disease frequency. PLoS Negl Trop Dis 2012; 6(10): e1865.
3. Dean AS, Crump L, Greter H, Hattendorf J, Schelling E, Zinsstag J. Clinical manifestations of human brucellosis: a systematic review and meta-analysis. PLoS Negl Trop Dis 2012; 6(12): e1929.
4. Alışkan H. Kültür ve serolojik yöntemlerin insan brusellozu tanısındaki değeri. Mikrobiyol Bul 2008; 42(1): 185-95.
5. Araj GF. Update on laboratory diagnosis of human brucellosis. Int J Antimicrob Agents 2010; 36(Suppl 1): S12-7.
6. Orduña A, Almaraz A, Prado A, et al. Evaluation of an immunocapture-agglutination test (Brucellacapt) for serodiagnosis of human brucellosis. J Clin Microbiol 2000; 38(11): 4000-5.
7. Gomez MC, Nieto JA, Rosa C, et al. Evaluation of seven tests for diagnosis of human brucellosis in an area where the disease is endemic. Clin Vaccine Immunol 2008; 15(6): 1031-3.
8. ODAK Brucella Coombs Gel Test. http://www.toprakmedikal.com/urunler.aspx?id=4
9. Kocagöz T. Türkiyede mikrobiyoloji alanında bilime dayalı üretim. ANKEM Derg 2014; 28(Ek 2): 115-9.
10. Viera AJ, Garrett JM. Understanding interobserver agreement: the kappa statistic. Fam Med 2005; 37(5): 360-3.
11. Casao MA, Navarro E, Solera J. Evaluation of Brucellacapt for the diagnosis of human brucellosis. J Infect 2004; 49(2):102-8.
12. Ardic N, Ozyurt M, Sezer O, Erdemoglu A, Haznedaroglu T. Comparison of Coombs and immunocapture-agglutination tests in the diagnosis of brucellosis. Chin Med J (Engl) 2005; 118(3): 252-4.
13. Özdemir M, Doğan B, Baysal B. Brusellozun serolojik tanısında yeni bir yöntem: İmmuncapture aglutinasyon testi. Genel Tıp Derg 2007:17(1): 9-13.
14. Serra J, Velasco J, Godoy P, Mendoza J. Can the Brucellacapt test be substituted for the Coombs test in the diagnosis of human brucellosis? Enferm Infecc Microbiol Clin 2001; 19(5): 202-5.
15. Bruselloz ve Tanısı. http://www.toprakmedikal.com/documents/Brucella.ppt

APA	irvem a, YÜCEL F, AKSARAY S, BOR E (2015). Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. , 181 - 187.
Chicago	irvem arzu,YÜCEL Fatma Muhterem,AKSARAY Sabahat,BOR Emire Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. (2015): 181 - 187.
MLA	irvem arzu,YÜCEL Fatma Muhterem,AKSARAY Sabahat,BOR Emire Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. , 2015, ss.181 - 187.
AMA	irvem a,YÜCEL F,AKSARAY S,BOR E Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. . 2015; 181 - 187.
Vancouver	irvem a,YÜCEL F,AKSARAY S,BOR E Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. . 2015; 181 - 187.
IEEE	irvem a,YÜCEL F,AKSARAY S,BOR E "Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması." , ss.181 - 187, 2015.
ISNAD	irvem, arzu vd. "Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması". (2015), 181-187.

APA	irvem a, YÜCEL F, AKSARAY S, BOR E (2015). Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, 49(2), 181 - 187.
Chicago	irvem arzu,YÜCEL Fatma Muhterem,AKSARAY Sabahat,BOR Emire Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni 49, no.2 (2015): 181 - 187.
MLA	irvem arzu,YÜCEL Fatma Muhterem,AKSARAY Sabahat,BOR Emire Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.49, no.2, 2015, ss.181 - 187.
AMA	irvem a,YÜCEL F,AKSARAY S,BOR E Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2015; 49(2): 181 - 187.
Vancouver	irvem a,YÜCEL F,AKSARAY S,BOR E Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2015; 49(2): 181 - 187.
IEEE	irvem a,YÜCEL F,AKSARAY S,BOR E "Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması." Mikrobiyoloji Bülteni, 49, ss.181 - 187, 2015.
ISNAD	irvem, arzu vd. "Brusellozun Serolojik Tanısında Yeni ve Hızlı Bir Yöntem Olan Brucella Coombs Jel Testi ile Diğer Yöntemlerin Karşılaştırılması". Mikrobiyoloji Bülteni 49/2 (2015), 181-187.