Coxiella burnetii, zoonotik bir enfeksiyon olan Q ateşinin etiyolojik etkenidir. Gram-negatif, pleomorf ik, kokobasil şeklinde, konak hücrenin fagolizozomlarında üreme yeteneğine sahip olan bir bakteridir. Morfolojik olarak, küçük hücreli varyantı ve büyük hücreli varyantı olmak üzere iki hücre tipine sahiptir. C.burnetii hücre duvarındaki LPS yapısına göre serolojik olarak faz I ve faz II varyantı olarak da ikiye ayrılmaktadır. Faz I, enfekte hayvanlarda ve insanlarda bulunan doğal fazdır ve oldukça virülandır. Faz II ise virülan değildir ve sadece hücre kültürlerinde veya embriyonlu tavuk yumurtası kültürlerinde seri pasajlardan sonra laboratuvarlarda elde edilebilir. Akut Q ateşi, insanların %50’sinde asemptomatik seyrederken, semptomatik seyrettiği kişilerde en sık grip benzeri klinik tablo, atipik pnömoni ve hepatit ile kendini göstermektedir. Olguların küçük bir kısmında hastalık kronikleşebilir, kronik Q ateşinde en sık görülen klinik tablo endokardittir. Bu çalışmada, C.burnetii faz I varyantından, faz değişimi çalışması yapılarak C.burnetii faz II varyantı elde edilmesi amaçlanmıştır. Çalışmamızda, endokardit tanısı alan bir hastanın kalp kapakçığı dokusundan, hücre kültürü yöntemi ile C.burnetii izolasyonu yapılmıştır. İzole edilen suştan indirekt f loresan antikor testi (IFAT) için C.burnetii faz I antijeni hazırlanmıştır. C.burnetii izolasyonu ve tanımlanması için takip eden işlemler uygulanmıştır. Kalp kapakçığı dokusu homojenize edilmiş ve doku ekstraksiyon kiti ile DNA ekstraksiyonu yapılmıştır. Doku DNA’sında gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (Rt-PCR) yöntemi ile C.burnetii PCR pozitif bulunmuştur. C.burnetii PCR pozitif doku örneği, Vero hücre kültürüne shell vial santrifügasyon yöntemi ile inoküle edilmiştir. Bir hafta inkübasyondan sonra kaldırılan Vero hücreleri IFAT lamlarına fikse edilmiş ve C.burnetii faz I IgG pozitif serum kullanılarak IFAT çalışılmıştır. Mikroskobik alanda, Vero hücrelerinde üremiş ve hücrelerin etrafını sarmış elma yeşili renkte bakteriler gözlenmiştir. Enfekte hücreler dondurma ve çözme işlemi ile parçalanarak bakteri süspansiyonu elde edil miştir. Bakteri süspansiyonundan elde edilen DNA tekrar C.burnetii Rt-PCR çalışılarak PCR sonucu pozitif belirlenmiş ve klinik örneğe göre daha erken siklusda pozitiflik tespit edilerek üreme doğrulanmıştır. İzolatımızdan elde edilen DNA ile 27F ve 1492R primerleri kullanılarak Coxiella 16S ribozomal RNA bölgesi PCR uygulanmış ve PCR ürünün DNA dizi analizi yapılarak elde edilen nükleotit dizileri GenBank’ta referans nükleotit dizileri ile karşılaştırılmıştır. İzolatımızın 16S ribozomal RNA nükleotit dizilişi, erişim numarası NR104916 olan Coxiella burnetii suşu ATCC VR-615 ile %99 benzer bulunmuştur. Kalp kapakçığından izole ettiğimiz C.burnetii izolatımız 16S ribozomal RNA dizi analizi ile de doğrulanmıştır. Suştan seri hücre kültürü pasajları yapılarak C.burnetii faz I varyantından C.burnetii faz II varyantı elde edilmeye çalışılmıştır. Her pasajdan sonra C.burnetii faz I ve faz II IgG pozitif serumlar ile IFAT uygulanarak faz değişimi gözlenmeye çalışılmıştır. Seri olarak yapılan 17 hücre kültürü pasajı sonunda faz değişimi gözlenmemiştir. Elde edilen bakteri süspansiyonlarından C.burnetii faz I IFAT antijeni hazırlanmıştır. Bu çalışmada, ülkemizde ilk defa endokarditli bir hastanın kalp kapakçığından hücre kültürü yöntemiyle C.burnetii izolasyonu ve izolatın moleküler, serolojik yöntemlerle tanımlanması sunulmuştur.