Yıl: 2013 Cilt: 47 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 11 - 18 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması

Öz:
Stafilokoklarda metisilin direnci mecA geni tarafından kodlanmakta, ancak mecA geninin heterojen ekspresyonu nedeniyle, metisilin direncinin doğru olarak belirlenmesi her zaman mümkün olamamaktadır. Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile mecA geninin saptanması altın standart yöntem olmakla birlikte, çoğu laboratuvarda moleküler yöntemlerin çalışılabileceği olanaklar bulunmadığından, metisiline dirençli suşları hızlı ve doğru olarak saptayabilecek, kolay uygulanabilir fenotipik yöntemlere ihtiyaç duyulmaktadır. Bu çalışmada, stafilokoklarda metisilin direncinin belirlenmesinde, mecA gen analizi çift primerli jel tabanlı multipleks PCR (Seeplex, Seegene Inc, Kore), sefoksitin disk difüzyon testi (30 μg, Oxoid, İngiltere), otomatize sistem (Phoenix 100, Becton Dickinson, ABD) ve kromojenik CHROMagar MRSA besiyerlerinin (CHROMagar Microbiology, Salubris, Türkiye) performanslarının karşılaştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, hastanede yatan hastaların yara yeri örneklerinden izole edilen 98 Staphylococcus aureus suşu alınmıştır. PCR ile 60 izolatın mecA geni taşıdığı belirlenmiş; izolatların 59unda sefoksitin disk difüzyon (SDD) testiyle, 61inde otomatize sistemle ve 65inde CHROMagar MRSA besiyeri ile metisilin direnci tanımlanmıştır. PCR ile mecA geni tespiti referans yöntem olarak alındığında, metisilin direncini saptamada kullanılan testlerin duyarlılık, özgüllük, pozitif ve negatif prediktif değeri SDD testi için sırasıyla %98.3, %100, %100 ve %97.4; otomatize sistem için sırasıyla %100, %97.4, %98.4 ve %100; CHROMagar MRSA besiyeri için %96.7, %81.6, %89.2 ve %93.9 olarak bulunmuştur. En yüksek duyarlılık ve negatif prediktif değer otomatize sistemde, en yüksek özgüllük ve pozitif prediktif değer SDD testinde elde edilmiştir. Kromojenik besiyerinin duyarlılığı 48 saat sonunda SDD testine yakın bulunmasına rağmen, özgüllüğü her iki inkübasyon süresi sonunda diğer testlerden daha düşük bulunmuştur. Kromojenik besiyerinin pozitif ve negatif prediktif değerleri de diğer testlere göre daha düşüktür. Moleküler inceleme yapılamayan laboratuvarlarda, metisilin direncinin saptanmasında stafilokok suşlarının mecA genini daha iyi indüklediği bilinen sefoksitin disk difüzyon testi veya iş yükü yoğun olan laboratuvarlarda otomatize sistemle minimum inhibisyon konsantrasyonun (MİK) belirlenmesi güvenilir bir yöntem olarak kullanılabilir. Sonuç olarak, kromojenik besiyerlerinin iş yükünün yoğun ve personel sayısının yetersiz olduğu laboratuvar koşullarında, özellikle tarama amaçlı kullanılabileceği; ancak özgüllüğünün düşük olması nedeniyle, yalancı pozitiflik olasılığına karşı pozitif saptanan suşların disk difüzyon ya da mikrodilüsyon gibi diğer yöntemlerle doğrulanması gerektiği kanısına varılmıştır.
Anahtar Kelime:

Konular: Mikrobiyoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Farmakoloji ve Eczacılık

Comparison of cefoxitin disk diffusion test, automated system and chromogenic medium for detection of methicillin resistance in staphylococcus aureus isolates

Öz:
The mecA gene is responsible for the development of methicillin resistance in staphylococci however accurate detection of methicillin resistance is not feasible evermore because of heterogenous expression of mecA gene. Although mecA gene determination by polymerase chain reaction (PCR) is considered as the gold standard method, molecular tests are not easily applied in all routine laboratories. Thus, for the rapid and accurate diagnosis of MRSA strains, easy and practical phenotypic tests are still required. This study was aimed to compare the performance of mecA gene analysis by gel bases multiplex PCR with dual primer (Seeplex, Seegene Inc, Korea), cefoxitin disc diffusion method (30 μg, Oxoid, UK), automated system (Phoenix 100, Becton Dickinson, USA) and chromogenic medium CHROMagar MRSA (CHROMagar Microbiology, Salubris, Turkey) for the detection of methicillin resistance in staphylococci. It was found that 60 of the 98 Staphylococcus aureus strains carried the mecA gene. Methicillin resistance was observed by cefoxitin disc diffusion test in 59 isolates, by automated system in 61 isolates, and by CHROMagar MRSA in 65 isolates. When mecA gene analysis was considered as the reference method, the sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of the tests that were used for the detection of methicillin resistance were found as 98.3%, 100%, 100% and 97.4% for cefoxitin disc diffusion (CDD) method; 100%, 97.4%, 98.4% and 100% for automated system; 96.7%, 81.6%, 89.2% and 93.9% for chromogenic medium CHROMagar MRSA, respectively. The highest sensitivity and negative predictive values were obtained by the automated system, and the highest specificity and positive predictive values were obtained by the CDD test. Although the sensitivity of chromogenic medium was found to be similar with the CDD test at the end of 48 hours, the specificity of chromogenic medium was lower than the other tests at the end of each incubation period. Likewise, positive and negative predictive values of the chromogenic medium were determined low compared to other tests. In laboratories that cannot perform molecular analysis, the determination of methicillin resistance should be done by the CDD test which is known to be a better inducer of the mecA gene expression of staphylococci. Determination of minimum inhibitory concentration (MIC) with automated systems can be the second choice especially in laboratories with intensive work loads. As a result chromogenic media can be particularly used for screening in laboratories that have a heavy workload and insufficient personnel number. However, due to its low specificity and the possibility of false positive results, it was recommended that positive strains should be confirmed by other methods such as disc diffusion or microdilution.
Anahtar Kelime:

Konular: Mikrobiyoloji Biyoteknoloji ve Uygulamalı Mikrobiyoloji Farmakoloji ve Eczacılık
Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik
APA Uzun B, ŞENER KARATAŞ A, güngör s, AFŞAR İ, ERGİN YÜKSEL Ö, Demirci M (2013). Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. , 11 - 18.
Chicago Uzun Berrin,ŞENER KARATAŞ Aslı Gamze,güngör serdar,AFŞAR İlhan,ERGİN YÜKSEL Özlem,Demirci Mustafa Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. (2013): 11 - 18.
MLA Uzun Berrin,ŞENER KARATAŞ Aslı Gamze,güngör serdar,AFŞAR İlhan,ERGİN YÜKSEL Özlem,Demirci Mustafa Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. , 2013, ss.11 - 18.
AMA Uzun B,ŞENER KARATAŞ A,güngör s,AFŞAR İ,ERGİN YÜKSEL Ö,Demirci M Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. . 2013; 11 - 18.
Vancouver Uzun B,ŞENER KARATAŞ A,güngör s,AFŞAR İ,ERGİN YÜKSEL Ö,Demirci M Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. . 2013; 11 - 18.
IEEE Uzun B,ŞENER KARATAŞ A,güngör s,AFŞAR İ,ERGİN YÜKSEL Ö,Demirci M "Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması." , ss.11 - 18, 2013.
ISNAD Uzun, Berrin vd. "Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması". (2013), 11-18.
APA Uzun B, ŞENER KARATAŞ A, güngör s, AFŞAR İ, ERGİN YÜKSEL Ö, Demirci M (2013). Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, 47(1), 11 - 18.
Chicago Uzun Berrin,ŞENER KARATAŞ Aslı Gamze,güngör serdar,AFŞAR İlhan,ERGİN YÜKSEL Özlem,Demirci Mustafa Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni 47, no.1 (2013): 11 - 18.
MLA Uzun Berrin,ŞENER KARATAŞ Aslı Gamze,güngör serdar,AFŞAR İlhan,ERGİN YÜKSEL Özlem,Demirci Mustafa Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.47, no.1, 2013, ss.11 - 18.
AMA Uzun B,ŞENER KARATAŞ A,güngör s,AFŞAR İ,ERGİN YÜKSEL Ö,Demirci M Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2013; 47(1): 11 - 18.
Vancouver Uzun B,ŞENER KARATAŞ A,güngör s,AFŞAR İ,ERGİN YÜKSEL Ö,Demirci M Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2013; 47(1): 11 - 18.
IEEE Uzun B,ŞENER KARATAŞ A,güngör s,AFŞAR İ,ERGİN YÜKSEL Ö,Demirci M "Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması." Mikrobiyoloji Bülteni, 47, ss.11 - 18, 2013.
ISNAD Uzun, Berrin vd. "Staphylococcus aureus suşlarındaki metisilin direncinin belirlenmesinde sefoksitin disk difüzyon testi, otomatize sistem ve kromojenik besiyerinin karşılaştırılması". Mikrobiyoloji Bülteni 47/1 (2013), 11-18.