Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması
Yıl: 2022 Cilt: 56 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 68 - 80 Metin Dili: Türkçe DOI: 10.5578/mb.20229950 İndeks Tarihi: 10-06-2022
Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması
Öz: Hepatit C Virüsü (HCV), tüm dünyada yaklaşık 185 milyon insanı enfekte ettiği tahmin edilen ve
her yıl 350 000 kişinin ölümüne sebep olan bir virüstür. HCV’nin yedi genotipi ve 100’den fazla alt tipi
bulunmaktadır. HCV tedavisinde hedef, kalıcı virolojik yanıt (KVY) olup, KVY’yi belirleyen en önemli viro-
lojik faktörler, genotip ve başlangıçtaki HCV-RNA düzeyleridir. Bu araştırmayla, “line probe assay (LIPA)”
yöntemiyle saptanan HCV genotiplerinin ve alt tiplerinin, dizi analiziyle karşılaştırılması amaçlanmıştır.
Kronik hepatit C enfeksiyonu tanısı almış, HCV RNA viral yükü 104 IU/ml ve üzeri olan 212 hasta örneğin-
de LIPA (NLM analytica, İtalya) ve dizi analizi yöntemleriyle HCV genotip ve alt tipleri araştırılmıştır. LIPA
yönteminde 5’UTR ve kor bölgeleri, dizi analizi yönteminde ise NS5B gen bölgesi çalışılmıştır. NS5B gen
bölgesinde 340 bp’lik bölge hemi-nested polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) yöntemiyle çoğaltıldıktan
sonra, dizi analizi işlemleri (ABI 3500 Genetic Analyzer, Applied Biosystems, ABD) gerçekleştirilmiştir. İsta-
tistiksel analizler, TURCOSA Analytics programı kullanılarak yapılmıştır. Çalışmada, LIPA yöntemiyle HCV
genotip ve alt tipleri araştırılan 212 hastanın 40 (%18.8)’ında Genotip 1a, 97 (%45.75)’sinde genotip 1b,
7 (%3.3)’sinde genotip 2, 12 (%5.6)’sinde genotip 2a/c, 2 (%0.94)’sinde genotip 2b, 19 (%8.96)’unda
genotip 3, 16 (%7.55)’sında genotip 4, 1 (%0.47)’inde genotip 4a, 15(%7.5)’inde genotip 4c/d, 1
(%0.47)’inde genotip 4h ve 2 (%0.94)’sinde genotip 5 bulunmuştur. Dizi analizi yöntemiyle değerlendi-
rilen 212 hastanın 20 (%9.43)’sinde genotip 1a, 118 (%55.6)’inde genotip 1b, 16 (%7.55)’sında genotip2a, 4 (%1.89)’ünde genotip 2b, 1 (%0.47)’inde genotip 2k, 21 (%9.91)’inde genotip 3a, 2 (%0.94)’sin-
de genotip 4a, 28 (%13.21)’inde genotip 4d ve 2 (%0.94)’sinde genotip 5a saptanmıştır. İki yöntem
arasındaki sonuç farklılığı istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p< 0.001). Viral yük-genotip ilişkisine
göre, en yüksek viral yük genotip 1a hastalarında saptanmıştır (p< 0.001). Sonuç olarak, çalışmamızda
HCV genotip ve alt tiplerinin belirlenmesi amacıyla, LIPA ve dizi analizi yöntemleri karşılaştırılmış ve iki
yöntem arasındaki genotip uyumu; genotip bazında %97.5, alt tip bazında %19 olarak saptanmıştır.
Kronik HCV hastalarında direkt etkili antiviral (DEA) tedavi protokolü, genotip/alt tip tayinine göre plan-
landığından, rutinde yaygın olarak çalışılan LIPA yönteminde elde edilen sonuçların dizi analizi yöntemiyle
uyumsuzluğu dikkate değerdir ve bu sonuçların daha fazla sayıda örnek içeren çalışmalarla desteklenmesi
gerektiği kanaatine varılmıştır.
Anahtar Kelime: Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik
- 1. Kandemir Ö, Gültekin O. Kronik Hepatit C enfeksiyonlu damar içi uyuşturucu madde kullanıcılarında Hepatit C virüs genotiplerinin dağılımı. Türkiye Klinikleri 2017; 37(1): 21-6.
- 2. Tagnouokam Ngoupo PA, Ngoufack MN, Kenmoe S, Lissock SF, Amougou-Atsama M, Banai R, et al. Hepatitis C virus genotyping based on Core and NS5B regions in Cameroonian patients. Virology Journal 2019; 16(101): 1214-9.
- 3. EASL. EASL recommendations on treatment of hepatitis C 2018. J Hepatol 2018; 69(1): 461-511.
- 4. Souii A, Elargoubi A, Fallecker C, Mastouri M, Drouet E. Hepatitis C genotype prevalence in Monastir region, Tunisia: correlation between 50 untranslated region (50UTR), Nonstructural 5B (NS5B), and core sequences in HCV subtyping. Curr Microbiol 2016; 73(3): 324-34.
- 5. Goletti S, Zuyten S, Goeminne L, Verhofstede C, Villalobos HR, Bodeus M, et al. Comparison of Sanger sequencing for hepatitis C virus genotyping with a commercial line probe assay in a tertiary hospital. BMC Infect Dis 2019; 19(738): 1-11.
- 6. Laperche S, Lunel, F, Izopet J, Alain S, Dény P, Duverlie G, et al. Comparison of hepatitis C virus NS5b and 5’ noncoding gene sequencing methods in a multicenter study. J Clin Microbiol 2005; 43(2): 733-9.
- 7. Uribe Noguez, LA, Mata Marín, JA, Ocaña Mondragón, A, Pompa Mera EN, Ribas-Aparicio RM, Arroyo Anduiza CI, et al. Comparison of direct sequencing of the NS5B region with the Versant HCV genotype 2.0 assay for genotyping of viral isolates in Mexico. J Infect Chemother 2020; 26(2): 205-10.
- 8. Smith DB. Bukh J, Kuiken C, Scott Muerhoff A, Rice CM, Stapleton JT, et al. Expanded Classification of Hepatitis C Virus into 7 genotypes and 67 subtypes: updated criteria and genotype assignment web resource. Hepatology 2014; 59(1): 318-27.
- 9. Petruzziello A, Marigliano S, Loquercio G, Cozzolino A, Cacciapuoti C. Global epidemiology of hepatitis C virus infection: an up-date of the distribution and circulation of hepatitis C virus genotypes. World J Gastroenterol 2016; 22(34): 7824-40.
- 10. Akgün S, Tarhan G, Sayıner HS, Akgün İ, Kök S. Adıyaman ilinde hepatit C virüsü genotip dağılımının belirlenmesi. Ortadoğu Tıp Derg 2016; 9(1): 1-5.
- 11. Erman Daloğlu A, Parkan ÖM, Erdoğan A, Peker BO, Can Sarınoğlu R, Sağlık İ, et al. Damar içi madde bağımlılığı olan ve madde bağımlısı olmayan hastalar arasında hepatit C virus (HCV) genotiplerinin dağılımı. Mikrobiyol Bul 2021;55(1):30-40.
- 12. Çalışkan A, Kirişçi O, Özkaya E, Özden S, Tümer S, Çağlar S, et al. Distribution and predominance of genotype 3 in Hepatitis C virus carriers in the province of Kahramanmaraş, Turkey. Hepat Mon 2015;15(4): e25142.
- 13. Borcak D, Çağır Ü, Yalçıner A. Nevşehir ilinde Hepatit C virüs genotip dağılımı ile serum alanin aminotransferaz ve kantitatif serum HCV RNA düzeyleri ilişkisi. ANKEM 2015; 29(1): 36-40.
- 14. Gökahmetoğlu S, Atalay MA, Kılınç A. Hepatit C virüs genotiplerinin pirosekanslama yöntemi ile belirlenmesi. Erciyes Tıp Derg 2011; 33(2): 99-102.
- 15. Kayman T, Karakükçü Ç, Karaman A, Gözütok F. Kayseri bölgesinde Hepatit C virüs enfeksiyonunun genotip dağılımı. Türk Mikrobiyol Cem Derg 2012; 42(1): 21-6.
- 16. Duran AÇ, Kibar F, Çetiner S, Yaman A. Çukurova Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesi’nde Hepatit C virus genotiplerinin ve HCV enfeksiyonu bulaş yollarının belirlenmesi. Turk Hij Den Biyol Derg 2017; 74(3): 201- 10.
- 17. Cirit OS, Mızraklı AU, Vurupalmaz Y, Gümüş HH, Özturhan H, Barış A. Genotyping distribution of Hepatitis C Virus in Şanlıurfa province and effect of Syrian patients. J Viral Hepat 2019; 25(2): 62-6.
- 18. Aydın M, Dülger AC. Kronik Hepatit C genotip 1’de güncel tedavi. Van Tıp Derg 2018; 25(4): 547-51.
- 19. Peng J, Lu Y, Liu W, Zhu Y, Yan X, Xu J, et al. Genotype distribution and molecular epidemiology of Hepatitis C Virus in Hubei, Central China. PloS One 2015; 10(9): 0137059.
- 20. Nutini MF, Hunter J, Giron L, Pires AF, Kohiyama IM, Camargo M, et al. HCV genotype profile in Brazil of monoinfected and HIV co-infected individuals: a survey representative of an entire country. PloS One 2019; 15(1): 0227082.
- 21. Sağlık İ, Mutlu D, Öngüt G, İnan D, Öğünç MD, Can RS, et al. Akdeniz Üniversitesi Hastanesi’nde kronik Hepatit C enfeksiyonu olan hastalarda Hepatit C Virüs genotipleri: beş yıllık sonuçların değerlendirilmesi. Mikrobiyol Bul 2014; 48(3): 429-37.
- 22. Nemoz B, Roger L, Leroy V, Poveda JD, Morand P, Larrat S. Evaluation of the cobas® GT hepatitis C virus genotyping assay in G1-6 viruses including low viral loads and LİPA failures. PloS One 2018; 13(3): 1-12.
- 23. Ngoc C, Thanh TT, Lan PT. Differential prevalence and geographic distribution of hepatitis C virus genotypes in acute and chronic hepatitis C patients in Vietnam. PloS One 2019; 14(3): 1-20.
- 24. Larrat S, Poveda JD, Coudret C, Fusilier K, Magnat N, Schmuck AS, et al. Sequencing assays for failed genotyping with the versant Hepatitis C virus genotype assay (LiPA), Version 2.0. J Clin Microbiol 2013; 51(9): 2815-21
- 25. Pagani E, Huemer HP, Pasquetto V, Cemin C, Molon L, Rossi P, et. al. Comparison of hepatitis C virus subtyping by ns5b sequencing with 5’UTR based methods. Minerva Med 2012; 103(4): 293-7.
- 26. Rodriguez C, Soulier A, Demontant V, Poiteau L, Darty MM, Bouvier-Alias, M,et al. A novel standardized deep sequencing-based assay for hepatitis C virus genotype determination. Sceintific Reports 2018; 8(4180): 1-8.
- 27. Tong YQ, Liu B, Liu H, Zheng HY, Gu J, Liu H, et al. Accurate genotyping of hepatitis C virus through nucleotide sequencing and identification of new HCV subtypes in China population. Clin Microbiol Infect 2015; 21(1): 874.e10.
- 28. McCormick AL, Macartney MJ, Abshir IA, Labbett W, Smith C, Irish D, et al. Evaluation of sequencing of HCV core/E1, NS5A and NS5B as a genotype predictive tool in comparison with commercial assays targeting 5’UTR. J Clin Virol 2015; 66(1): 56-9.
- 29. Ar Z, El-Din HM, Bahnassy AA, El-Shehabi AM, El-Leethy H, Omar A. TRUGENE sequencing versus INNO-LiPA for sub-genotyping of HCV genotype-4. J Med Virol 2005; 75(3): 412-20
APA | ÖZMEN P, gökahmetoğlu s (2022). Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. , 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
Chicago | ÖZMEN PELİN,gökahmetoğlu selma Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. (2022): 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
MLA | ÖZMEN PELİN,gökahmetoğlu selma Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. , 2022, ss.68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
AMA | ÖZMEN P,gökahmetoğlu s Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. . 2022; 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
Vancouver | ÖZMEN P,gökahmetoğlu s Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. . 2022; 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
IEEE | ÖZMEN P,gökahmetoğlu s "Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması." , ss.68 - 80, 2022. 10.5578/mb.20229950 |
ISNAD | ÖZMEN, PELİN - gökahmetoğlu, selma. "Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması". (2022), 68-80. https://doi.org/10.5578/mb.20229950 |
APA | ÖZMEN P, gökahmetoğlu s (2022). Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, 56(1), 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
Chicago | ÖZMEN PELİN,gökahmetoğlu selma Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni 56, no.1 (2022): 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
MLA | ÖZMEN PELİN,gökahmetoğlu selma Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.56, no.1, 2022, ss.68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
AMA | ÖZMEN P,gökahmetoğlu s Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2022; 56(1): 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
Vancouver | ÖZMEN P,gökahmetoğlu s Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması. Mikrobiyoloji Bülteni. 2022; 56(1): 68 - 80. 10.5578/mb.20229950 |
IEEE | ÖZMEN P,gökahmetoğlu s "Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması." Mikrobiyoloji Bülteni, 56, ss.68 - 80, 2022. 10.5578/mb.20229950 |
ISNAD | ÖZMEN, PELİN - gökahmetoğlu, selma. "Hepatit C Virüs (HCV) Genotiplerinin “Reverse Hybridisation Strip Assay” ve DNA Dizi Analizi Yöntemleriyle Araştırılması". Mikrobiyoloji Bülteni 56/1 (2022), 68-80. https://doi.org/10.5578/mb.20229950 |